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    當(dāng)前位置:首頁(yè)/基地圖片> 三七皂苷hplc指紋圖譜,hplc指紋圖譜相似度在07以上能說(shuō)沒(méi)有顯著性差異嗎

    三七皂苷hplc指紋圖譜,hplc指紋圖譜相似度在07以上能說(shuō)沒(méi)有顯著性差異嗎

    本文目錄一覽hplc指紋圖譜相似度在07以上能說(shuō)沒(méi)有顯著性差異嗎2,三七三醇皂苷的指紋圖譜3,08153707012938規(guī)律是什麼4,深度研究生熟三七粉的成分和功效對(duì)比分析5,5000457363182955273782716,用什么……

    本文目錄一覽

    1,hplc指紋圖譜相似度在07以上能說(shuō)沒(méi)有顯著性差異嗎

    不能,一般是在0.85以上
    沒(méi)有

    三七皂苷hplc指紋圖譜

    2,三七三醇皂苷的指紋圖譜

    照高效液相色譜法(附錄 Ⅵ D )。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈為流動(dòng)相 A ,以水為流動(dòng)相 B ,按下表的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫;流速每分鐘為 1.0ml ;檢測(cè)波長(zhǎng)為 210nm 。三七皂苷 R 1 與鄰近色譜峰的分離度應(yīng)大于 1.5 , 人參皂苷 Rg 1 、三七皂苷 Re 色譜峰的分離度應(yīng)大于 1.3 。時(shí)間(分)乙腈( % )水( % ) 0 ~ 5 15 85 5 ~ 43 1 5→ 25 8 5→ 75 43 ~ 55 2 5→ 35 75 → 65 55 ~ 60 3 5→ 40 65 → 60 60 ~ 62 4 0→ 15 6 0→ 85 參照物溶液的制備取人參皂苷 Rg 1 、人參皂苷 Re 和三七皂苷 R 1 對(duì)照品適量,精密稱(chēng)定,加乙腈 - 水( 19.580.5 ∶ )溶解并稀釋成每 1ml 中含人參皂苷 Rg 1 2.5mg 、人參皂苷 Re0.4mg 和三七皂苷 R 1 0.8mg 的混合溶液,搖勻,即得。供試品溶液的制備取本品 120 μ g ,精密稱(chēng)定,置 25ml 量瓶中,加入乙腈 - 水( 19.580.5 ∶ )約 20ml 超聲處理 30 分鐘,放冷,用乙腈 - 水( 19.580.5 ∶ )稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò) , 棄去初濾液,取續(xù)濾液 , 即得。測(cè)定法分別精密吸取參照物溶液和供試品溶液各 20μl ,注入液相色譜儀,測(cè)定,即得。按中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng),供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜經(jīng)相似度計(jì)算,相似度應(yīng)不得低于 0.90 。對(duì)照指紋圖譜 5 個(gè)共有峰中峰 2 :三七皂苷 R 1 峰 3 :人參皂苷 Rg 1 ,峰 4 ( S ):人參皂苷 Re 積分參數(shù)以 Rg 1 峰面積的千分之五設(shè)置為最小峰面積值。

    三七皂苷hplc指紋圖譜

    3,08153707 012938 規(guī)律是什麼

    答案為04 規(guī)律如圖所示
    王少華 王少康

    三七皂苷hplc指紋圖譜

    4,深度研究生熟三七粉的成分和功效對(duì)比分析

    一、生、熟三七粉的定義 ◆生三七粉,也就是我們常說(shuō)的三七粉,生三七粉的提法是與熟三七粉相對(duì)而言的。◆熟三七粉,則是將生三七粉通過(guò)高溫蒸制的方法,使其變成熟三七粉,在高溫蒸制的過(guò)程中,三七中的皂苷成分會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)化。高溫蒸制的時(shí)間和溫度是很講究的,不同的時(shí)間,不同的溫度,蒸制出來(lái)的熟三七粉的顏色和口感也是不一樣的。 ? 苗鄉(xiāng)熟三七粉經(jīng)過(guò)中國(guó)藥科大學(xué)中藥學(xué)院的研究團(tuán)隊(duì)經(jīng)過(guò)了大量樣本的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析,科學(xué)地確定了高溫蒸制的時(shí)間和溫度。二、 生、熟三七粉的成分對(duì)比分析 通過(guò)這張圖表,我們對(duì)比一下三七指紋圖譜中的6個(gè)成份: (1)人參皂苷Rb1:生1.958,熟1.047,1.9倍; (2)人參皂苷Rg1:生2.901,熟1.929,1.5倍; (3)人參皂苷Re:生0.176,熟0.046,3.8倍; (4)人參皂苷Rd:生0.722,熟0.302,2.4倍; (5)三七皂苷R1:生0.705,熟0.355,2倍; (6)三七皂苷R2:生0.008,熟0.093,1/10倍。 另外還有 (7)人參皂苷Rg2:生0,熟0.025; (8)人參皂苷Rg3:生0,熟0.05。 可以看出: (1)鑒別三七主要成份的人參皂苷Rb1、Rg1、Re、Rd、三七皂苷R1,生三七粉的含量是熟三七粉的1.5~3.8倍;(2)然而,熟三七粉中產(chǎn)生了新的成份:人參皂苷Rg2和Rg3,生三七粉中的含量為0;熟三七粉中的R2含量是生三七粉的10倍。 三、單體皂苷成分的含量對(duì)比分析和功效 01、人參皂苷Rb1:人參皂苷Rb1在生三七粉中含量為1.958,在熟三七粉中含量為1.047,生的含量是熟的1.9倍。 人參皂苷Rb1的作用有: ●抗心律失常; ●保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞; ●保護(hù)心肌細(xì)胞; ●保護(hù)大腦神經(jīng)細(xì)胞。 02、人參皂苷Rg1:人參皂苷Rg1在生三七粉中含量為2.901,在熟三七粉中含量為1.929,生的含量是熟的1.5倍,是含量最多的單體皂苷。 人參皂苷Rg1的作用有: ●舒張血管; ●雙向性調(diào)節(jié)血壓(有可能先升后降); ●提高性功能,抗疲勞; ●促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生,提高神經(jīng)可塑性,預(yù)防老年癡呆等神經(jīng)退行性疾病。 03、人參皂苷Re:人參皂苷Re在生三七粉中含量為0.176,在熟三七粉中含量為0.046,生的含量是熟的3.8倍。 人參皂苷Re的作用有: ●增強(qiáng)胰島素,降低血糖; ●對(duì)抗血小板聚集和血栓形成; ●抗疲勞; ●延緩神經(jīng)細(xì)胞衰老,提高記憶力。 04、人參皂苷Rd:人參皂苷Rd在生三七粉中含量為0.722,在熟三七粉中含量為0.302,生的含量是熟的2.4倍。人體內(nèi)腸道酶可以把人參皂苷Rb1代謝為Rd,再被腸道吸收。 研究表明,人參皂苷Rd可以: ●擴(kuò)張血管,降低血壓; ●顯著抑制人宮頸癌He-La細(xì)胞增殖,并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡; ●明顯的免疫調(diào)節(jié); ●抑制腎小球膜細(xì)胞的增殖,改善藥物不良反應(yīng)所導(dǎo)致的腎功能損傷; ●保護(hù)神經(jīng),改善急性缺血性腦卒中(即腦梗)所導(dǎo)致的神經(jīng)功能障礙。 05、人參皂苷Rg2:人參皂苷Rg2在生三七粉中含量為0,在熟三七粉中含量為0.025。 人參皂苷Rg2是野山參“起死回生”作用的主要成分,可以: ●抗急性心源性休克; ●抗失血性休克; ●快速改善心肌缺血和缺氧; ●明顯增強(qiáng)心功能。 06、人參皂苷Rg3:人參皂苷Rg3在生三七粉中含量為0,在熟三七粉中含量為0.05。人參皂苷Rg3是目前抗腫瘤的主要藥物之一,通過(guò)腸道和肝功能的吸收和代謝,產(chǎn)生人參皂苷Rh2,協(xié)同抗腫瘤、抗轉(zhuǎn)移。已經(jīng)作為腫瘤新生血管抑制劑在臨床使用。 研究表明,人參皂苷Rg3可以: ●通過(guò)抑制腫瘤新生血管的形成來(lái)抑制肺癌、胃癌和繼發(fā)卵巢癌的生長(zhǎng); ●對(duì)中醫(yī)氣虛癥的癌癥(包括非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌、胃癌、肝癌等)有很好的改善; ●提高腫瘤患者免疫功能,并對(duì)化療引起的白細(xì)胞下降有保護(hù)作用,提高腫瘤患者的生存質(zhì)量; ●無(wú)明顯毒副作用,無(wú)心、肝、腎功的損害,偶有口干、口舌生瘡。 07、人參皂苷Rh1:人參皂苷Rh1在生三七粉中含量為0.056,在熟三七粉中含量為0.03,在人參中的含量為0.0015,西洋參則不含有。三七中單體皂苷含量最多的人參皂苷Rg1在腸道代謝后可產(chǎn)生人參皂苷Rh1。 研究表明,人參皂苷Rh1可以: ●明顯改善神經(jīng)細(xì)胞缺氧和退行性疾病; ●保護(hù)缺血引起的心肌損傷; ●明顯抑制人宮頸癌細(xì)胞(HeLa)、人體骨肉瘤細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞的增殖和表達(dá); ●對(duì)白血病有改善作用; ●延緩白內(nèi)障形成,減輕晶狀體混濁,提高SOD活性,優(yōu)于維生素E。 08、人參皂苷Rh2:人參皂苷Rh2在生、熟三七粉成分含量表中均沒(méi)有,它是一種次級(jí)人參皂苷,即通過(guò)其他皂苷加熱或者腸道菌代謝,糖鏈斷裂降解而成,但含量極其稀少,約為十萬(wàn)分之一,即0.00001。熟三七粉中的人參皂苷Rg3通過(guò)腸道菌和肝功能的吸收和代謝,可以產(chǎn)生人參皂苷Rh2。 研究表明,人參皂苷Rh2具有很強(qiáng)的抗腫瘤功能: ●可以抑制腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移和新生血管的生成; ●誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和阻滯細(xì)胞周期而抑制腫瘤的生長(zhǎng); ●逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的耐藥性,增強(qiáng)抗癌藥的藥效; ●誘導(dǎo)細(xì)胞分化使其逆轉(zhuǎn); ●顯著抑制惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移能力,降低其惡性程度。 09、三七皂苷R1:三七皂苷R1是三七的特有成分,在生三七粉中含量為0.705,在熟三七粉中含量為0.355,生的含量是熟的2倍。對(duì)照品不一樣,含量也不一樣,有些論文中三七樣品的R1含量更高,達(dá)到1.42。 三七皂苷R1的作用: ●活血化瘀的主要成分; ●保護(hù)心血管系統(tǒng); ●增強(qiáng)甲肝病毒(HAV)抗原的免疫原性,改善肝臟微循環(huán)障礙和肝細(xì)胞損傷; ●保護(hù)神經(jīng),鎮(zhèn)靜; ●抑制人宮頸癌細(xì)胞(HeLa)的增殖,對(duì)人白血病細(xì)胞(HL-60)、結(jié)腸癌細(xì)胞(SW-480)也有抑制作用; ●達(dá)到一定濃度后,具有一定的抗輻射作用。 10、三七皂苷R2:三七皂苷R2是三七的特有成分,在生三七粉中含量為0.008,在熟三七粉中含量為0.093,熟的含量是生的11.6倍。三七皂苷R2研究較少,已知作用: ●減少心肌缺血、心律失常的發(fā)生概率; ●減少心肌缺血時(shí)的心肌梗塞面積,保護(hù)心肌缺血性損傷; ●一定的鎮(zhèn)靜作用。四、生、熟三七粉中的常量和微量 常量,即在三七中存在比較多的成分:人參皂苷Rb1、Rg1、Re、Rd和三七皂苷R1,這5個(gè)成分也是三七指紋圖譜的判定指標(biāo)。 微量,即在三七中存在較少的成分,要么本身就含有,要么通過(guò)加熱或腸道菌代謝產(chǎn)生:人參皂苷Rg2、Rg3、Rh1、Rh2和三七皂苷R2,等等,還有已分離但未標(biāo)明的70多個(gè)單體皂苷。這些常量、微量、已知、未知的成分組成了一個(gè)名叫三七總皂苷的復(fù)合體。五、轉(zhuǎn)化和代謝 通過(guò)加熱或腸道菌代謝,可將三七中的原生皂苷轉(zhuǎn)化或代謝為原本沒(méi)有的次生皂苷: ? 生三七粉加熱 可轉(zhuǎn)化出 人參皂苷 Rg2,Rg3; ? 人參皂苷Rb1 可代謝為 人參皂苷Rd; ? 人參皂苷Rg1 可代謝為 人參皂苷Rh1; ? 人參皂苷Rg3 可代謝為 人參皂苷Rh2。 六、功效歸類(lèi) (1) 保護(hù)心肌缺血,抗心律失常和心源性休克,舒張血管: 人參皂苷Rb1、Rg1、Rg2、Rd、Rh1和三七皂苷R1、R2; (2) 抗血栓形成: 人參皂苷Re; (3) 保護(hù)神經(jīng),抗神經(jīng)退化 (老年癡呆癥): 人參皂苷Rb1、Rg1、Re、Rd、Rh1; (4) 抗腫瘤 (人宮頸癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、肺癌等): 人參皂苷Rg3、Rh1、Rh2和三七皂苷R1; (5) 增強(qiáng)胰島,降低血糖: 人參皂苷Re; (6) 保護(hù)肝臟: 三七皂苷R1; (7) 抗疲勞: 人參皂苷Rg1,Re。 七、定性和定量 熟三七粉的效果還取決于高溫蒸制的時(shí)間和溫度,從定性來(lái)看,成分是存在的,從定量來(lái)看,含量由于對(duì)照品不一樣、蒸制的時(shí)間和溫度不一樣,數(shù)據(jù)也會(huì)不一樣。所以,這個(gè)數(shù)據(jù)也只是參考數(shù)據(jù),但也非常有助于我們更好地了解生、熟三七粉。 八、三七的神龍藥性 生、熟三七粉里面本身就是一個(gè)多種單體皂苷組成的總皂苷復(fù)合體,那么多的單體皂苷,每個(gè)單體皂苷又有那么多的功效,能把功效和原理說(shuō)清楚才叫怪了!而吃了生、熟三七粉,效果不好也才叫怪了!這個(gè)就叫三七的神龍藥性! 九、三七不是百分百 世間沒(méi)有什么東西是百分百的,滿(mǎn)招損、過(guò)猶不及是形而上的道,三七也不例外。不能說(shuō):三七對(duì)百分百的人有百分百的效果,但我們可以肯定地說(shuō):三七對(duì)很大一部分人有很好的效果,具體有多好,那就要看跟三七的緣分和造化了。

    5,500045736318295527378271

    解 原式=5000-[(45+55)+(73+27)+(63+37)+(18+82)+(29+71)]=5000-500=4500。

    7,中藥指紋圖譜的特點(diǎn)

    中藥指紋圖譜是一種綜合的,可量化的鑒定手段,它是建立在中藥化學(xué)成分系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上,主要用于評(píng)價(jià)中藥材以及中藥制劑半成品質(zhì)量的真實(shí)性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。“整體性”和“模糊性”為其顯著特點(diǎn)。中藥指紋圖譜(fingerprinting)是借用DNA指紋圖譜發(fā)展而來(lái)。最先發(fā)展起來(lái)的是中藥化學(xué)成分色譜指紋圖譜,特別是高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜。HPLC具有很高的分離度,可把復(fù)雜的化學(xué)成分進(jìn)行分離而形成高低不同的峰組成一張色譜圖,這些色譜峰的高度和峰面積分別代表了各種不同化學(xué)成分和其含量。由此可見(jiàn),中藥指紋圖譜比DNA指紋圖譜更進(jìn)一步的發(fā)展在于:不但有特征的體現(xiàn)(各種化學(xué)成分的個(gè)數(shù)和相對(duì)位置——保留時(shí)間)可作定性鑒別使用,還體現(xiàn)了量的概念。峰的高度和峰面積表示了某個(gè)化學(xué)成分的含量,而各峰的峰高(或峰面積)的比值體現(xiàn)了各種化學(xué)成分間的相對(duì)含量;量的概念的引入、定性和定量的結(jié)合賦予中藥指紋圖譜更大的功效;中藥指紋圖譜不僅可以進(jìn)行個(gè)體、某物種的“唯一性”的鑒定,還可以將其“量”的特征和其他體系掛鉤。因此,中藥指紋圖譜不僅是一種中藥質(zhì)量控制模式和技術(shù),更可以發(fā)展成為一種采用各種指紋圖語(yǔ)來(lái)進(jìn)行中藥理論(復(fù)雜系統(tǒng))和新藥開(kāi)發(fā)的研究體系和研究模式。

    8,中藥指紋圖譜的分析技術(shù)

    (一)中藥指紋圖譜的定義、特點(diǎn)和分類(lèi)  中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后,采用一定的分析手段,得到的能夠標(biāo)示其化學(xué)特征的色譜圖或光譜圖。  中藥指紋圖譜是一種綜合的,可量化的鑒定手段,它是建立在中藥化學(xué)成分系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上,主要用于評(píng)價(jià)中藥材以及中藥制劑半成品質(zhì)量的真實(shí)性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。“整體性”和“模糊性”為其顯著特點(diǎn)。  目前,中藥指紋圖譜技術(shù)已涉及眾多方法,包括薄層掃描(tlcs)、高效液相色譜法(hplc)、氣相色譜法(gc)和高效毛細(xì)管電泳法(hpce)等色譜法以及紫外光譜法(uv)、紅外光譜法(ir)、質(zhì)譜法(ms)、核磁共振法(nmr)和x—射線衍射法等光譜法。其中色譜方法為主流方法,尤其是hplc、tlcs和gc已成為公認(rèn)的三種常規(guī)分析手段。由于hplc具有分離效能高、選擇性高、檢測(cè)靈敏度高、分析速度快、應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn);中藥成分絕大多數(shù)可在高效液相色譜儀上進(jìn)行分析檢測(cè),且積累較豐富的應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)。因此高效液相色譜法已成為中藥指紋圖譜技術(shù)的首選方法。隨著hplc— ms和gc—ms等聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用,中藥指紋圖譜技術(shù)更趨完善。  (二)中藥指紋圖譜建立的意義  中藥及其制劑均為多組分復(fù)雜體系,因此評(píng)價(jià)其質(zhì)量應(yīng)采用與之相適應(yīng)的,能提供豐富鑒別信息的檢測(cè)方法,但現(xiàn)行的顯微鑒別、理化鑒別和含量測(cè)定等方法都不足以解決這一問(wèn)題,建立中藥指紋圖譜將能較為全面地反映中藥及其制劑中所含化學(xué)成分的種類(lèi)與數(shù)量,進(jìn)而對(duì)藥品質(zhì)量進(jìn)行整體描述和評(píng)價(jià)。這也正好符合中醫(yī)藥整體學(xué)說(shuō)。在此基礎(chǔ)上,如果進(jìn)一步開(kāi)展譜效學(xué)研究,可使中藥質(zhì)量與其藥效真正結(jié)合起來(lái),有助于闡明中藥作用機(jī)理。總之,中藥指紋圖譜的研究和建立,對(duì)于提高中藥質(zhì)量,促進(jìn)中藥現(xiàn)代化具有重要意義。  (三)中藥指紋圖譜研究概況  以指紋圖譜作為中藥(天然藥物)提取物及其制劑的質(zhì)量控制方法,已成為目前國(guó)際共識(shí),各種符合中藥(天然藥物)特色的指紋圖譜控制技術(shù)體系正在研究和建立。美國(guó)食品藥品管理局(fda)允許草藥保健品申報(bào)資料中提供色譜指紋圖譜;世界衛(wèi)生組織(who)在1996年草藥評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則中也規(guī)定,如果草藥的活性成分不明確,可以提供色譜指紋圖譜以證明產(chǎn)品質(zhì)量的一致;歐共體在草藥質(zhì)量指南中亦稱(chēng),單靠測(cè)定某種有效成分考查質(zhì)量的穩(wěn)定性是不夠的,因?yàn)椴菟幖捌渲苿┦且哉w為活性物質(zhì)。色譜指紋圖譜尤其是薄層色譜的鮮明的指紋圖譜是很有用的。國(guó)外指紋圖譜的應(yīng)用,目的在于解決成分復(fù)雜,有效成分不明確的植物藥質(zhì)量檢測(cè)和產(chǎn)品批次間質(zhì)量差異的問(wèn)題。其中德國(guó)研制的銀杏葉提取物制劑是一個(gè)突出的例子。他們應(yīng)用指紋圖譜制定了相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn),該圖譜體現(xiàn)了制劑所含的33個(gè)化學(xué)成分(主要為黃酮類(lèi)和內(nèi)酯類(lèi))和各自的含量。經(jīng)化學(xué)成分和藥效相關(guān)性研究,發(fā)現(xiàn)約24%銀杏黃酮和約6%銀杏內(nèi)酯組成的提取物具有最佳療效。此外,采用“混批勾兌”法,可使最終產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,指紋圖譜重現(xiàn)性良好,含量浮動(dòng)范圍為5%左右。  20世紀(jì)70年代我國(guó)已有學(xué)者嘗試使用tlcs對(duì)中成藥進(jìn)行分析,因主客觀條件的限制,技術(shù)和時(shí)機(jī)的不成熟,沒(méi)有得到公認(rèn);20世紀(jì)90年代《中國(guó)藥典》增設(shè)了中藥化學(xué)對(duì)照品和對(duì)照藥材,為中藥指紋圖譜的研究奠定了基礎(chǔ)。隨著色譜技術(shù)的迅速發(fā)展和檢測(cè)能力的顯著增強(qiáng),為指紋圖譜的研究和應(yīng)用提供了良好的技術(shù)保證。目前我國(guó)已對(duì)中藥注射劑做出了必須用指紋圖譜進(jìn)行檢測(cè)的規(guī)定,同時(shí)提出了具體的技術(shù)要求;在中藥材規(guī)范化生產(chǎn)實(shí)施過(guò)程中指紋圖譜亦有較廣泛的應(yīng)用。  但是作為一項(xiàng)新技術(shù),中藥指紋圖譜在實(shí)際應(yīng)用中還面臨許多問(wèn)題,只有進(jìn)一步加強(qiáng)中藥材種植加工和中成藥生產(chǎn)貯存的規(guī)范化;中藥化學(xué)成分和中藥藥理研究的系統(tǒng)化和標(biāo)準(zhǔn)化;以及技術(shù)上多學(xué)科的滲透,才能保證中藥質(zhì)量的穩(wěn)定,進(jìn)而保證中藥指紋圖譜的建立

    9,大孔吸收樹(shù)脂在現(xiàn)代中藥生產(chǎn)中的應(yīng)用

    大孔吸附樹(shù)脂應(yīng)用新技術(shù) 近幾年來(lái),由于大孔吸附樹(shù)脂新技術(shù)的引進(jìn),使中草藥有效單體成分或復(fù)方中某一單體成分的指標(biāo)得到提高。它具有快速、高效、方便、靈敏、選擇性好等優(yōu)點(diǎn),因而發(fā)展速度很快,應(yīng)用面很廣。 3.1 大孔吸附樹(shù)脂在中藥有效成分純化中的應(yīng)用 大孔吸附樹(shù)脂用于白芍總苷、甜葉菊苷、刺玫果苷、三七總苷、西洋參總皂苷、絞股藍(lán)總皂苷、甘草酸、三棵針生物堿、丹皮酚、銀杏葉黃酮、制川烏和制草烏中總生物堿、薄蓋靈芝中尿嘧啶和尿嘧啶核苷、川芎嗪和阿魏酸的分離。 3.2 大孔吸附樹(shù)脂在中藥復(fù)方制劑中的應(yīng)用 章氏12)采用D型大孔吸附樹(shù)脂法測(cè)定了三七及其制劑冠心寧總皂苷。也有人將三七蜂王漿用Dzol柱處理,測(cè)定三七皂苷的含量,回收率為104.4%.劉氏等在對(duì)復(fù)肢膠囊(含有三七等25味中藥)的復(fù)方制劑進(jìn)行內(nèi)控試驗(yàn)中,采用大孔吸附樹(shù)脂吸附法有效地分離三七皂苷,并進(jìn)行了 TLC定性鑒別,結(jié)果斑點(diǎn)分離度好,具有較好的重現(xiàn)性。任氏等‘s’采用大孔吸附樹(shù)脂D型(天津骨膠廠)純化氣血注射液、生脈注射液中的人參總皂苷。胡氏等L6)采用大孔吸附樹(shù)脂分離一比色法,測(cè)定生脈注射液中的人參總皂苷,結(jié)果提高了分離效果.減少了影響因素,使樣品含量重現(xiàn)性好,平均回收率達(dá)100. 1%以上。 苯乙烯苷類(lèi)是肉蓯蓉的有效成分,大孔吸附樹(shù)脂(AB—B型)對(duì)苯乙醇苷類(lèi)成分有較好的分離性能17).采用Dlol型大孔吸附樹(shù)脂能純化黃芪中的黃芪甲苷.壽氏用低極性的GDXl04大孔吸附樹(shù)脂,分離純化疏肝止痛片中芍藥苷成分。鐘氏以殼聚糖為絮凝劑,采用樹(shù)脂M為吸附劑,對(duì)龜鹿補(bǔ)腎液的生產(chǎn)工藝進(jìn)行了改進(jìn).結(jié)果新工藝比原工藝減少了一步濃縮,而且殼聚糖、樹(shù)脂M的成本比酒精低,可縮短生產(chǎn)周期,減少能耗,降低生產(chǎn)成本,提高生產(chǎn)效率。王氏等采用南開(kāi)大學(xué)生產(chǎn)的X5大孔吸附樹(shù)脂分離純化龜鹿補(bǔ)腎液中的淫羊藿苷成分。經(jīng)X5吸附樹(shù)脂處理后的樣品,可有效地除去部分雜質(zhì),使其在高效夜相色鋪中達(dá)到理想的分離效果。 鑒于大孔吸附樹(shù)脂一般是以聚苯乙烯為骨架,合成時(shí)使用了小分子的致孔劑、交聯(lián)劑等,用前需要處理,并在提取物和制劑中檢測(cè)其殘留量。應(yīng)符合要求。另外,由于大孔吸附樹(shù)脂屬于極性吸附,一種樹(shù)脂只能對(duì)某一極性段的成分具有良好的吸附,故一般適宜于單味藥中某類(lèi)成分的定向提取。中藥復(fù)方成分非常復(fù)雜,僅用某種樹(shù)脂很難兼顧到所有成分,國(guó)家不鼓勵(lì)中藥復(fù)方使用大孔吸附樹(shù)脂精制,使用時(shí)應(yīng)該非常慎重。
    大孔吸收樹(shù)脂在現(xiàn)代中藥生產(chǎn)中的應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂是近代發(fā)展起來(lái)的一類(lèi)有機(jī)高聚物吸附劑,70年代末開(kāi)始將其應(yīng)用于中草藥成分的提取分離。中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所植化室試用大孔吸附樹(shù)脂對(duì)糖、生物堿、黃酮等進(jìn)行吸附,并在此基礎(chǔ)上用于天麻、赤勺、靈芝和照山白等中草藥的提取分離,結(jié)果表明大孔吸附樹(shù)脂是分離中草藥水溶性成分的一種有效方法。用此法從甘草中可提取分離出甘草甜素結(jié)晶。以含生物堿、黃酮、水溶性酚性化合物和無(wú)機(jī)礦物質(zhì)的4種中藥有效部位的單味藥材(黃連、葛根、丹參、石膏)水提液為樣本,在LD605型樹(shù)脂上進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附研究,比較其吸附特性參數(shù)。結(jié)果表明除無(wú)機(jī)礦物質(zhì)外,其它中藥有效部位均可不同程度的被樹(shù)脂吸附純化。不同結(jié)構(gòu)的大孔吸附樹(shù)脂對(duì)親水性酚類(lèi)衍生物的吸附作用研究表明不同類(lèi)型大孔吸附樹(shù)脂均能從極稀水溶液中富集微量親水性酚類(lèi)衍生物,且易洗脫,吸附作用隨吸附物質(zhì)的結(jié)構(gòu)不同而有所不同,同類(lèi)吸附物質(zhì)在各種樹(shù)脂上的吸附容量均與其極性水溶性有關(guān)。用D型非極性樹(shù)脂提取了絞股藍(lán)皂甙,總皂甙收率在2.15%左右。用D1300大孔樹(shù)脂精制“右歸煎液”,其干浸膏得率在4~5%之間,所得干浸膏不易吸潮,貯藏方便,其吸附回收率以5-羥甲基糖醛計(jì),為83.3%。用D-101型非極性樹(shù)脂提取了甜菊總甙,粗品收率8%左右,精品收率在3%左右。用大孔吸附樹(shù)脂提取精制三七總皂甙,所得產(chǎn)品純度高,質(zhì)量穩(wěn)定,成本低。將大孔吸附樹(shù)脂用于銀杏葉的提取,提取物中銀杏黃酮含量穩(wěn)定在26%以上。江蘇色可賽思樹(shù)脂有限公司整理用大孔吸附樹(shù)脂分離出的川芎總提物中川芎嗪和阿魏酸的含量約為25%~29%,收率為0.6%。另外大孔吸附樹(shù)脂還可用于含量測(cè)定前樣品的預(yù)分離。黃酮精制純化張紀(jì)興等對(duì)地錦草的提取工藝進(jìn)行了研究,旨在提高總黃酮的收率,選用D101型大孔樹(shù)脂,以地錦草總黃酮含量為考察指標(biāo),采用L9(34)正交試驗(yàn)表,以直接影響地錦草總黃酮收率的上柱量、吸附時(shí)間及洗脫液的濃度為實(shí)驗(yàn)因素,每個(gè)因素取3個(gè)水平。結(jié)果10ml樣品液(每1ml75%乙醇液含地錦草干浸膏0.5g)上柱、靜置吸附時(shí)間30min、用95%乙醇洗脫地錦草總黃酮為最佳工藝;洗脫液干燥后的總固體物中的地錦草總黃酮含量大于16%,高于醇提干浸膏的7.61%,且洗脫率大于93%。高紅寧等采用紫外分光光度法測(cè)定苦參中總黃酮的含量,使用AB-8型大孔吸附樹(shù)脂對(duì)苦參總黃酮的吸附性能及原液濃度、pH值、流速、洗脫劑的種類(lèi)對(duì)吸附性能的影響進(jìn)行了研究,結(jié)果AB-8型樹(shù)脂對(duì)苦參總黃酮的適宜吸附條件為原液濃度0.285mg/ml、pH值4、流速每小時(shí)3倍樹(shù)脂體積、洗脫劑用50%乙醇時(shí),解吸效果較好,表明AB-8型樹(shù)脂精制苦參總黃酮是可行的。麻秀萍等用不同型號(hào)的大孔吸附樹(shù)脂研究了中藥銀杏葉的提取物銀杏葉黃酮的分離,發(fā)現(xiàn)S-8型樹(shù)脂吸附量為126.7mg/g,洗脫溶劑的乙醇濃度90%,解吸率52.9%,AB-8型樹(shù)脂吸附量102.8mg/g,用溶劑為90%的乙醇解吸,解吸率是97.9%,表明不同型號(hào)的樹(shù)脂對(duì)同一成分的吸附量、解吸率不同。崔成九等用大孔樹(shù)脂分離葛根中的總黃酮,將用70%乙醇提取的葛根濃縮液加到大孔樹(shù)脂柱上,先用水洗脫,再用70%乙醇洗脫至薄層色譜(TLC)檢查無(wú)葛根素斑點(diǎn)為止,結(jié)果葛根總黃酮收率為9.92%(占生藥總黃酮的84.58%),高于正丁醇法的5.42%。兩種方法的主要成分基本一致,但用大孔樹(shù)脂法分離葛根總黃酮具有收率高、成本低、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),可供大生產(chǎn)使用。皂苷精制純化赤芍為中藥,其主要成分為芍藥苷、羥基芍藥苷、芍藥苷內(nèi)酯等化合物,簡(jiǎn)稱(chēng)赤芍總苷。姜換榮等用大孔吸附樹(shù)脂分離赤芍總苷,芍藥以70%的乙醇回流提取,減壓濃縮,過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱,分別用水、20%乙醇洗脫,收集20%乙醇洗脫液,減壓濃縮得赤芍總苷,并用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)所得赤芍總苷中的芍藥苷含量進(jìn)行測(cè)定,赤芍總苷的收率為5.4%,其中芍藥苷的含量為75%。本法操作簡(jiǎn)便,得率穩(wěn)定,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。金芳等用D101型大孔吸附樹(shù)脂吸附含芍藥中藥復(fù)方提取液,以排除其他成分的干擾,并將50%乙醇洗脫液用HPLC法測(cè)定,結(jié)果可以快速準(zhǔn)確地測(cè)定復(fù)方中藥制劑中的芍藥苷含量,且重現(xiàn)性好,回收率較高。臧琛等以中藥抗感冒顆粒中芍藥苷含量為指標(biāo),比較了醇沉、超濾及大孔吸附樹(shù)脂精制3種方法,結(jié)果芍藥苷的含量大小依次為醇沉、大孔樹(shù)脂、超濾法。醇沉法含量雖高,但工藝較為復(fù)雜,耗時(shí)長(zhǎng)。陳延清采用HPLC法測(cè)定丹參素、芍藥苷的含量,選用7種不同類(lèi)型的大孔吸附樹(shù)脂(X-5,AB-8,NK-2,NKA-2,NK-9,D3520,D101,WLD),精制后提取物的含固率顯著降低,丹參素的損失都很大,X-5,AB-8,WLD3種樹(shù)脂對(duì)芍藥苷的保留率都在80%以上。7種大孔樹(shù)脂在樂(lè)脈膠囊的精制中對(duì)丹參素保留率都很低,因而對(duì)丹參藥材不宜采用;部分類(lèi)型樹(shù)脂對(duì)精制芍藥苷類(lèi)成分可以采用。茍奎斌等采用大孔吸附樹(shù)脂,用HPLC法測(cè)定肝得寧片中的連翹苷的含量,用DA-101型樹(shù)脂吸附樣品,以水洗脫干擾成分,將70%乙醇洗脫液用于含量測(cè)定。利用HPLC法檢測(cè)大孔樹(shù)脂柱處理過(guò)的樣品液,操作步驟少,色譜性污染小,柱壓低,具有分離度高、專(zhuān)屬性強(qiáng)及重現(xiàn)性好、靈敏度高等特點(diǎn)。蔡雄等研究D101型大孔吸附樹(shù)脂富集、純化人參總皂苷的工藝條件及參數(shù)。人參提取液45ml(5.88mg/ml)上大孔樹(shù)脂柱(15mm×90mm,干重2.52g),用蒸餾水100ml、50%乙醇100ml依次洗脫,人參總皂苷富集于50%乙醇洗脫液中,且該法除雜質(zhì)能力強(qiáng);通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂富集與純化后,人參總皂苷洗脫率在90%以上,50%乙醇洗脫液干燥后總固物中人參總皂苷純度可達(dá)60.1%。劉中秋等研究了大孔樹(shù)脂吸附法富集保和丸中有效成分的工藝條件及參數(shù),以保和丸中的陳皮的主要成分橙皮苷和總固物為評(píng)價(jià)指標(biāo)。結(jié)果保和丸提取液(500mg/ml)5ml上D101型大孔樹(shù)脂柱(15mm×10mm),吸附30min后,先用100ml蒸餾水洗脫除去雜質(zhì),然后用100ml50%乙醇洗脫橙皮苷為最佳工藝條件;通過(guò)大孔樹(shù)脂富集后橙皮苷洗脫率在95%以上,50%乙醇洗脫液干燥后總固物約為處方量的4%。劉中秋等將D101型大孔樹(shù)脂用于分離三七皂苷,結(jié)果吸附量為174.5mg/g,用50%乙醇解吸,解吸率達(dá)80%,產(chǎn)品純度71%。金京玲用D101型樹(shù)脂提取分離蒺藜總皂苷,結(jié)果吸附量為6mg/g,用濃度為80%的乙醇解吸,解吸率為96%。劉中秋等研究了中藥毛冬青中的有效成分毛冬青總皂苷的提取分離工藝,選用D101型大孔吸附樹(shù)脂,結(jié)果吸附量為120mg/g,用50%乙醇解吸,解吸率為95%,產(chǎn)品純度71%。上述結(jié)果表明同一型號(hào)的樹(shù)脂對(duì)不同成分的吸附量不同。杜江等將D3520型大孔吸附樹(shù)脂用于黃褐毛忍冬總皂苷的提取分離,并與原工藝有機(jī)溶劑提取法進(jìn)行比較,結(jié)果總皂苷的純度、得率均明顯高于原法,且工藝簡(jiǎn)化、成本降低。生物堿精制純化傳統(tǒng)方法一般用陰離子交換樹(shù)脂分離純化生物堿,解吸時(shí)需要用酸、堿或鹽類(lèi)洗脫劑,會(huì)引入雜質(zhì),給后來(lái)的分離帶來(lái)不便,換用吸附樹(shù)脂則可避免此類(lèi)問(wèn)題。劉俊紅等將3種大孔吸附樹(shù)脂(D101,DA-201,WLD-3)應(yīng)用于延胡索生物堿的提取分離,方法是讓延胡索水提取液通過(guò)已處理過(guò)的樹(shù)脂柱,用水洗至流出液無(wú)色,然后分別用30%,40%,50%,60%,70%,80%,90%,95%乙醇依次洗脫,收集各段洗脫液,進(jìn)行薄層鑒別。結(jié)果從樹(shù)脂上洗脫的延胡索乙素占總生藥量D101型為0.069%,WLD-3型為0.072%,DA-201型為0.053%。樹(shù)脂柱用40%乙醇洗脫后除去了干擾性成分,便于用HPLC法測(cè)定,保護(hù)了色譜柱,且經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂提取分離的延胡索生物堿成品體積小,相對(duì)含量高,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,具有良好的生理活性。羅集鵬等將大孔吸附樹(shù)脂用于小檗堿的富集與定量分析,把黃連粉末以70%甲醇超聲提取30min,加到已處理的大孔樹(shù)脂小柱上,用pH值為10~11的水洗脫,再用含0.5%硫酸的50%甲醇80ml洗脫,洗脫液用10%氫氧化鈉調(diào)至堿性后,于水浴上揮去大部分溶劑,并轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中,用水稀釋至刻度,以HPLC法測(cè)定,結(jié)果小檗堿與其他生物堿能很好地分離。表明大孔吸附樹(shù)脂對(duì)醛式或醇式小檗堿具有良好的吸附性能,且不易被弱堿性水解吸,可用于黃連及其制劑尤其是含糖制劑中小檗堿的富集和水溶性雜質(zhì)的去除。楊樺等采用大孔吸附樹(shù)脂比較并篩選烏頭類(lèi)生物堿的提取分離最佳工藝條件,將川烏水提取液制備成8ml/g濃縮液,上柱,測(cè)定總生物堿的含量,結(jié)果該方法可分離出樣品中85%以上的烏頭類(lèi)生物堿,同時(shí)可除去浸膏中總量為82%的水溶性固體雜質(zhì)。復(fù)方制劑精制純化饒品昌等用大孔樹(shù)脂D1300,通過(guò)正交試驗(yàn)探討了右歸煎液的精制工藝,結(jié)果影響精制的主要因素為右歸煎液濃度、流速和徑高比,樹(shù)脂最大吸附量為1.10g生藥/ml,吸附回收率為83.34%(以5-羥甲基糖醛計(jì))。晏亦林等將四逆湯提取液上大孔樹(shù)脂,水洗后用70%乙醇洗脫,四逆湯精制樣品的TLC測(cè)試結(jié)果表明,經(jīng)大孔樹(shù)脂處理后3味主要成分基本能檢出,樹(shù)脂處理前后樣品的HPLC圖譜峰位、峰形基本相似,但TLC及HPLC圖譜中烏頭堿特征峰不明顯。使用方法在運(yùn)用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行分離精制工藝時(shí),其大致操作步驟為:大孔吸附樹(shù)脂預(yù)處理——樹(shù)脂上柱——藥液上柱——大孔吸附樹(shù)脂的解吸——大孔吸附樹(shù)脂的清洗、再生。由于每一個(gè)操作單元都會(huì)影響到大孔吸附樹(shù)脂的分離效果,因此對(duì)大孔吸附樹(shù)脂的精制工藝和分離技術(shù)的要求就相對(duì)較高。使用注意事項(xiàng)該類(lèi)樹(shù)脂在通常的儲(chǔ)存及使用條件下性質(zhì)十分穩(wěn)定,不溶于水、酸、堿及有機(jī)溶劑,也不與它們發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。搬運(yùn)、裝卸操作應(yīng)輕緩,堆放穩(wěn)定、規(guī)則,勿猛烈摔打。如灑落會(huì)導(dǎo)致地面濕 滑,要注意防止滑倒。儲(chǔ)存此種材料的儲(chǔ)存溫度請(qǐng)勿高于90℃,最高使用溫度180℃。濕態(tài)0℃以上保存。儲(chǔ)存狀態(tài)下請(qǐng)保持包裝密封完好,以防失水;如發(fā)生干燥失水,應(yīng)以乙醇浸泡干態(tài)樹(shù)脂約2小時(shí),用清水洗干凈后再重新包裝或使用。嚴(yán)防冬季將球體凍裂。如發(fā)現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,請(qǐng)于室溫下緩慢融化。運(yùn)輸或儲(chǔ)存過(guò)程中嚴(yán)防和有異味、有毒物品及強(qiáng)氧化劑混雜堆放。前景大孔吸附樹(shù)脂純化技術(shù)在中藥制藥工業(yè)中是有發(fā)展前景的實(shí)用新技術(shù)之一,盡管它在中藥有效成分的精制純化方面還存在著一些問(wèn)題。隨著研究的深入以及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、法規(guī)的進(jìn)一步完善,一定會(huì)開(kāi)發(fā)出高選擇性的樹(shù)脂,以進(jìn)一步提高中藥有效成分的提取、分離、富集效率。
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