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                                    硅膠柱色譜分離三七皂苷，硅膠柱層析甲醇洗脫為什么容易產(chǎn)生氣泡 
        
    
    
    

    

    

    
    
        
    
            
    硅膠柱色譜分離三七皂苷，硅膠柱層析甲醇洗脫為什么容易產(chǎn)生氣泡 
    

            
    
                發(fā)布時(shí)間：2023-06-11 09:45
                編輯：網(wǎng)絡(luò ) 
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                    本文目錄一覽硅膠柱層析甲醇洗脫為什么容易產(chǎn)生氣泡2，設計分離黃酮三萜皂苷和生物堿流程3，皂苷如何分離4，提取皂苷時(shí)可選擇哪些溶劑提取方法如何常用的分離純化方法有哪5，硅膠柱層析為什么用不同的溶劑過(guò)柱子會(huì )有不同的結果原先溶劑展6，硅膠柱層……
                
    
            
    

            
    



                
    本文目錄一覽
    1，硅膠柱層析甲醇洗脫為什么容易產(chǎn)生氣泡
    

    對于具體皂苷的分離,若使用硅膠柱層析,一般以氯仿:甲醇:水進(jìn)行洗脫,氯仿:甲醇:...因為水甲醇梯度洗脫很容易產(chǎn)生氣泡。
    應該是前者 但是一般硅膠柱層析是逐漸增大極性的 我感覺(jué)如果甲醇的極性大于硅膠柱所吸附的物質(zhì)的極性也會(huì )把改物質(zhì)洗脫下來(lái)
    硅膠柱色譜分離三七皂苷
    

    2，設計分離黃酮三萜皂苷和生物堿流程
    

    






皂苷部分極性較大，首先應該附集皂苷部位，通?？捎谜〈驾腿』蚴谴罂讟?shù)脂得到總皂苷部位。對于具體皂苷的分離，若使用硅膠柱層析，一般以氯仿：甲醇：水進(jìn)行洗脫，氯仿：甲醇：水一般為9：1：0.1，8：2：0.3，7：3：0.5。黃酮類(lèi)化合物在硅膠上的吸附較多，可以采取減壓硅膠柱或者中壓硅膠柱，上樣量稍大一些（這樣可以減小吸附量），將樣品分段，然后采用sephadex LH－20進(jìn)行細分。多糖提取方法既有熱水浸提法、酸堿浸提法、酶解提取法、微波輔助提取法、超聲輔助提取法和超高壓提取法等單一方法,也有超聲微波輔助法、微波輔助酶法、超聲波輔助酶法等聯(lián)用方法。多糖分離純化過(guò)程一般是先除雜,再對多糖組分進(jìn)行分級純化。分級純化的常用方法有沉淀法、凝膠色譜法、陰離子交換色譜法、大孔樹(shù)脂柱色譜法、超濾法等。


    硅膠柱色譜分離三七皂苷
    

    3，皂苷如何分離
    

    我做的時(shí)候用80%乙醇提取，大孔樹(shù)脂以乙醇30，50，70，90%洗脫，取50%和70%的硅膠柱層析，氯仿-甲醇-水梯度洗脫，具體梯度要看你的薄層情況，先要用氯仿-甲醇-水做TLC，查看不同梯度各個(gè)點(diǎn)的情況，再利用這個(gè)條件跑柱。之后可以配合制備HPLC。
    謝謝epon的及時(shí)回復，能不能氯仿甲醇的含水量說(shuō)得更詳細些。我這有張TLC照片，展開(kāi)劑是氯仿-甲醇-水（13：7：2）的下層,你看柱色譜的洗脫劑如何安排比較合適呢？可惜粘貼不上照片
    硅膠柱色譜分離三七皂苷
    

    4，提取皂苷時(shí)可選擇哪些溶劑 提取方法如何 常用的分離純化方法有哪
    

    






皂苷是一類(lèi)天然的高分子化合物，主要存在于許多植物中，包括黃豆、苜蓿、洋蔥、甘藍等。皂苷的化學(xué)結構特點(diǎn)是含有親水基和疏水基，因此它們在水和有機溶劑中都具有溶解性。在提取皂苷時(shí)，可選擇以下幾種溶劑：乙醇：乙醇是一種廣泛應用的皂苷提取溶劑，它能夠有效地提取皂苷，并具有良好的穩定性和低毒性。丙酮：丙酮也是一種常用的皂苷提取溶劑，它對皂苷的提取效果較好，同時(shí)具有易揮發(fā)、低毒性等優(yōu)點(diǎn)。甲醇：甲醇是一種具有強溶解性的有機溶劑，能夠有效地提取皂苷，但由于甲醇的毒性較大，使用時(shí)需要注意。氯仿：氯仿是一種有機溶劑，對皂苷的提取效果也比較好，但由于其毒性較大，使用時(shí)需要謹慎。在選擇溶劑時(shí)，需要考慮到其對皂苷的提取效果、溶劑的安全性和成本等因素，根據實(shí)際需要進(jìn)行選擇。皂苷的提取方法主要有兩種，即水提法和有機溶劑提取法。水提法：將干燥的皂苷粉末加入水中，加熱至沸騰，保持沸騰狀態(tài)一段時(shí)間，使皂苷充分溶解。然后冷卻并過(guò)濾，得到皂苷的水提取物。有機溶劑提取法：將干燥的皂苷粉末加入適量的有機溶劑中，加熱并攪拌，使皂苷充分溶解。然后冷卻并過(guò)濾，得到皂苷的有機溶劑提取物。通常，有機溶劑提取法的提取效果更好，但由于有機溶劑的毒性和揮發(fā)性，使用時(shí)需要謹慎。常用的皂苷分離純化方法主要包括：硅膠柱層析、逆流色譜、高效液相色譜、凝膠滲透色譜等。硅膠柱層析是皂苷分離純化的常用方法之一，通過(guò)調整硅膠柱層析是皂苷分離純化的常用方法之一，通過(guò)調整硅膠柱層析條件，可以實(shí)現不同種類(lèi)和不同極性的皂苷的分離純化。逆流色譜是一種較新的皂苷分離純化方法，它可以有效地分離和純化不同種類(lèi)和不同極性的皂苷，并且具有高效、高選擇性、高分辨率等優(yōu)點(diǎn)。高效液相色譜是一種快速、高效的皂苷分離純化方法，它可以實(shí)現對復雜皂苷混合物的高效分離和純化。凝膠滲透色譜是一種常用的皂苷分子量測定方法，可以通過(guò)測定樣品在凝膠滲透色譜柱中的分子量分布情況，判斷樣品中皂苷的分子量大小。除了以上方法外，還有一些其他的分離純化方法，例如離子交換色譜、薄層層析、毛細管電泳等，這些方法都可以實(shí)現皂苷的分離純化，具體選擇何種方法需要考慮到樣品特性和實(shí)驗要求?？偟膩?lái)說(shuō)，提取皂苷是一項重要的研究工作，需要選擇合適的提取溶劑和方法，并結合適當的分離純化方法，以獲得高純度、高活性的皂苷樣品，為后續的研究工作奠定基礎。


    

    5，硅膠柱層析為什么用不同的溶劑過(guò)柱子會(huì )有不同的結果原先溶劑展
    

    柱層析原理:柱層析法的分離原理是根據物質(zhì)在硅膠上的吸附力不同而使各組分分離。一般情況下極性較大的物質(zhì)易被硅膠吸附，極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附。當采用溶劑洗脫時(shí)，發(fā)生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的過(guò)程，吸附力較強的組分，移動(dòng)的距離小，后出柱；吸附力較弱的組分，移動(dòng)的距離大，先出柱。硅膠柱層析流動(dòng)相：極性小的用乙酸乙酯：石油醚系統；極性較大的用甲醇：氯仿系統；極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸一般都是利用極性相似相容原理，看流動(dòng)相與固定相的極性，大部分是固定相的極性小于流動(dòng)相，然后流動(dòng)相的極性與所要洗脫的物質(zhì)極性比較接近，從而將物質(zhì)洗脫下來(lái)。
    

    6，硅膠柱層析的硅膠柱層析慣用方法
    

    1.稱(chēng)量。200-300目硅膠，稱(chēng)30-70倍于上樣量；如果極難分，也可以用100倍量的硅膠H。干硅膠的視密度在0.4左右，所以要稱(chēng)40g硅膠，用燒杯量100ml也可以。2.攪成勻漿。加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系，就用石油醚拌；如果洗脫劑是氯仿/醇體系，就用氯仿拌。如果不能攪成勻漿，說(shuō)明溶劑中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不與水配伍走分配色譜的話(huà)，必須預先用無(wú)水硫酸鈉久置干燥。氯仿用無(wú)水氯化鈣干燥，以除去1%的醇。如果樣品對酸敏感，不能用氯仿體系過(guò)柱。3.裝柱。將柱底用棉花塞緊，不必用海沙，加入約1/3體積石油醚（氯仿），裝上蓄液球，打開(kāi)柱下活塞，將勻漿一次傾入蓄液球內。隨著(zhù)沉降，會(huì )有一些硅膠沾在蓄液球內，用石油醚（氯仿）將其沖入柱中。4.壓實(shí)。沉降完成后，加入更多的石油醚，用雙聯(lián)球或氣泵加壓，直至流速恒定。柱床約被壓縮至9/10體積。無(wú)論走常壓柱或加壓柱，都應進(jìn)行這一步，可使分離度提高很多，且可以避免過(guò)柱時(shí)由于柱床萎縮產(chǎn)生開(kāi)裂。5.上樣。干法濕法都可以。海沙是沒(méi)必要的。上樣后，加入一些洗脫劑，再將一團脫脂棉塞至接近硅膠表面。然后就可以放心地加入大量洗脫劑，而不會(huì )沖壞硅膠表面。6.過(guò)柱和收集。柱層析實(shí)際上是在擴散和分離之間的權衡。太低的洗脫強度并不好，推薦用梯度洗脫。收集的例子：10mg上樣量，1g硅膠H，0.5ml收一餾分；1-2g上樣量，50g硅膠（200-300目），20-50ml收一餾分。7.檢測。要更多地使用專(zhuān)用噴顯劑，如果僅用紫外燈，會(huì )損失較多產(chǎn)品，紫外的靈敏度一般比噴顯劑低1-2個(gè)數量級。8.送譜。收集的產(chǎn)品旋干，在送譜前通常需要重結晶。如果樣品太少或為液體，可過(guò)一小凝膠柱，作為送譜前的最后純化手段?？沙渥V1.5ppm左右所謂的“硅膠”峰。注意事項1.先根據TLC方法篩選好洗脫劑，使兩相鄰物質(zhì)Rf值之差最大化2.將柱子必須裝平整、均勻3.考慮有限柱填料的吸附量4.可考慮用梯度法分開(kāi)并洗脫
    

    7，柱層層析硅膠有什么用
    

    柱層析硅膠在生物工程技術(shù)中應用的突出優(yōu)勢
  （1）具有剛性的骨架結構，機械強度高，可以耐受30MPa以?xún)鹊膲毫Γ?
  （2）優(yōu)良的吸附性能，對性質(zhì)、結構相似乃至同分異構體都有理想的分離功能；
  （3）有良好的熱穩定性和化學(xué)穩定性；
  （4）與有機柱填料相比，硅膠為固體以SiO2為基質(zhì)的膠體，結構致密，在應用中不會(huì )發(fā)生有機質(zhì)流失而污染目標產(chǎn)物；
  （5）能從多組分溶液中有選擇地吸附提純同分異構體組分；
  （6）在制備柱層析硅膠過(guò)程中，可以通過(guò)控制不同工藝條件生產(chǎn)出平均孔徑20?-20000?的一系列產(chǎn)品以適應不同性質(zhì)、分子量和分子結構的物質(zhì)的分離純化。
3) 試劑柱層析硅膠及應用
    試劑柱層析硅膠是具有固體特性的膠態(tài)體系，由形成凝集結構的膠體粒子構成。膠體粒子是水合狀態(tài)硅膠（多硅酸）的縮聚物，屬非晶態(tài)物質(zhì)。膠體粒子的集合體的間隙形成試劑柱層析硅膠顆粒內部的微孔隙結構。因此，它是一種具有豐富微孔結構，高比表面積、高純度、高活性的優(yōu)質(zhì)吸附材料。
    試劑柱層析硅膠的主要性能特點(diǎn)--吸附特性，取決于原料硅膠生產(chǎn)過(guò)程中所形成的微孔結構和內孔表面。因此，生產(chǎn)過(guò)程中首先注重原料--粗孔塊狀硅膠質(zhì)量的優(yōu)選，優(yōu)選指標應控制：吸附容量80±2%，比表面積約360m2/g，平均孔徑要求在9nm（90 Angstrom)左右。在選擇原料的基礎上，進(jìn)一步加工。其加工過(guò)程主要是：原料粉碎 粒度分級 酸處理 純水洗滌干燥 包裝檢驗。
    試劑柱層析主要控制指標：
氯化物（cl）≤0.004%
鐵 (Fe) ≤0.02%
PH(10%水懸浮液)5-6
    試劑柱層析硅膠的主要用途有以下幾個(gè)方面：
（1） 用于中草藥及化學(xué)合成藥物、生物活性物質(zhì)的分離提??；
（2） 工業(yè)上生物發(fā)酵過(guò)程中用于提取高分子蛋白的多肽等生物活性物質(zhì)和用于酸工程技術(shù)；
（3） 通過(guò)柱層析硅膠的吸附分離制備高純物質(zhì)；
（4） 有機物質(zhì)的脫水精制；
（5） 食用植物油脫除有害成分；
（6） 用于石油制品的精制，如抽提油（石腦油在600C-900C的食留份）脫除芳烴類(lèi)雜質(zhì)的精制等。

    柱層析硅膠的分離、提純、脫水精制機理；柱層析硅膠的微觀(guān)結構與通用硅膠沒(méi)有大的差別，構成膠體骨架的SiO2呈硅氧四面體結合，原子間的力場(chǎng)是平衡的。如前所述，硅膠有很高的比表面積，硅膠粒子內部孔隙的表面結構與形成的骨架內部結構不同，表面的硅原子與膠體所含的結構水形成硅醇基，即，這種結構的不平衡性使硅膠的表面產(chǎn)生自由力場(chǎng)，即對水分子或其他極性分 子有吸附能力，被吸附物質(zhì)因分子極性強弱不同，膠體粒子表面對其表現的吸附力大小有不同程度的差別。由于這方面原因，硅膠對不同物質(zhì)的混合物的吸附具有選擇性。當分子極性較強的物質(zhì)組份通過(guò)硅膠表面時(shí)，與硅膠產(chǎn)生的吸附力也較強，該物質(zhì)組份在硅膠表面的保留時(shí)間較長(cháng)；相反，分子極性較弱的組份，其保留時(shí)間較短。故不同物質(zhì)的混合物因在通過(guò)硅膠過(guò)程中因保留時(shí)間的差別而得到分離。對于分子極性很強的物質(zhì)，硅膠對其吸附能力很強，如水分子即是。在這種情況下，被吸附的物質(zhì)分子只有在獲得足夠的能量（如熱能）時(shí)才能克服硅膠表面產(chǎn)生的引力場(chǎng)的位壘而脫離硅膠表面。這樣，在通常條件下，含有強極性物質(zhì)組份的混合物在通過(guò)硅膠柱層時(shí)，其中的強極性物質(zhì)組份被保留在硅膠孔隙內部，從而表現出硅膠的脫水精制或提純物質(zhì)的能力。
      碩遠化工生產(chǎn)的柱層層析硅膠，是按照每戶(hù)一標準生產(chǎn)的，其產(chǎn)品粒度，孔徑，比表面，孔容等指標均按照客戶(hù)最佳使用狀態(tài)生產(chǎn)。
    硅膠層析法的分離原理是根據物質(zhì)在硅膠上的吸附力不同而得到分離， 一般情況下極性較大的物質(zhì)易被硅膠吸附，極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附，整個(gè)層析過(guò)程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過(guò)程。
試劑柱層析硅膠是具有固體特性的膠態(tài)體系，由形成凝集結構的膠體粒子構成。膠體粒子是水合狀態(tài)硅膠（多硅酸）的縮聚物，屬非晶態(tài)物質(zhì)。膠體粒子的集合體的間隙形成試劑柱層析硅膠顆粒內部的微孔隙結構。因此，它是一種具有豐富微孔結構，高比表面積、高純度、高活性的優(yōu)質(zhì)吸附材料。
柱層析硅膠的微觀(guān)結構與通用硅膠沒(méi)有大的差別，構成膠體骨架的SiO2呈硅氧四面體結合，原子間的力場(chǎng)是平衡的。如前所述，硅膠有很高的比表面積，硅膠粒子內部孔隙的表面結構與形成的骨架內部結構不同，表面的硅原子與膠體所含的結構水形成硅醇基，即 ，這種結構的不平衡性使硅膠的表面產(chǎn)生自由力場(chǎng)，即對水分子或其他極性分 子有吸附能力，被吸附物質(zhì)因分子極性強弱不同，膠體粒子表面對其表現的吸附力大小有不同程度的差別。由于這方面原因，硅膠對不同物質(zhì)的混合物的吸附具有選擇性。當分子極性較強的物質(zhì)組份通過(guò)硅膠表面時(shí)，與硅膠產(chǎn)生的吸附力也較強，該物質(zhì)組份在硅膠表面的保留時(shí)間較長(cháng)；相反，分子極性較弱的組份，其保留時(shí)間較短。故不同物質(zhì)的混合物因在通過(guò)硅膠過(guò)程中因保留時(shí)間的差別而得到分離。對于分子極性很強的物質(zhì)，硅膠對其吸附能力很強，如水分子即是。在這種情況下，被吸附的物質(zhì)分子只有在獲得足夠的能量（如熱能）時(shí)才能克服硅膠表面產(chǎn)生的引力場(chǎng)的位壘而脫離硅膠表面。這樣，在通常條件下，含有強極性物質(zhì)組份的混合物在通過(guò)硅膠柱層時(shí)，其中的強極性物質(zhì)組份被保留在硅膠孔隙內部，從而表現出硅膠的脫水精制或提純物質(zhì)的能力。

    




            
    

            
            
            
            
            
            
            
            
            
            
        
    
        
        
    
            
    
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