三七化學(xué)的成分，三七粉的營(yíng)養成份表
發(fā)布時(shí)間：2022-05-03 05:03
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三七粉的營(yíng)養成份表前人對三七的化學(xué)成分進(jìn)行了較為系統的研究。到目前為止，從三七中分離得到的化學(xué)成分主要有皂苷、黃酮、揮發(fā)油、氨基酸、多糖、淀粉、蛋白質(zhì)
1，三七粉的營(yíng)養成份表
前人對三七的化學(xué)成分進(jìn)行了較為系統的研究。到目前為止，從三七中分離得到的化學(xué)成分主要有皂苷、黃酮、揮發(fā)油、氨基酸、多糖、淀粉、蛋白質(zhì)等以及部分無(wú)機化學(xué)成分如氮、磷、鉀等大量元素和鈷、鉬、銫等微量元素。
2，三七含有哪些維生素和礦物質(zhì)成分
三七含有氨基酸，不飽和脂肪酸，蛋白質(zhì)，維生素，礦物質(zhì)等60多種血管中必須的營(yíng)養成份。長(cháng)期服用對身體是有百利而無(wú)一害的。五谷雜糧，各種水果蔬菜中都含有人體所需要的各種維生素和礦物質(zhì)，缺一不可，只要不偏食，不挑食，這些都會(huì )自然平衡的。如果單問(wèn)哪些東西里面含有維生素和礦物質(zhì)，那只能說(shuō)每一種里面都有不同的維生素和礦物質(zhì)的。
3，三七的主要成份是不是三七總皂苷
含五加皂甙a,五加皂甙b；葡萄糖等； 五加皂甙a,b；均能刺激血脂及膽固醇的新陳代謝； 還含有一種酮類(lèi)化合物；能降低血壓，擴張冠狀動(dòng)脈，增加冠狀動(dòng)脈血流量，并降低心臟耗血量，減輕心臟工作； 三七及其合劑；主要治療心絞痛------ 三七所含皂甙，還有使細保核酸中的r,n,a,促進(jìn)產(chǎn)生蛋白質(zhì)，增加抗力作用。對乙肝恢復應有幫助。 三七總皂苷是根據提取、分離技術(shù)從優(yōu)質(zhì)三七中提取有效的藥用成分包括20多種皂苷活性物質(zhì)、17種微量元素、蛋白、豐富的維生素、多糖等 ，三七的主要成份是三七總皂苷。三七的主要化學(xué)成分有三七皂苷、黃酮苷等。三七皂苷與人參皂苷相似，為達瑪烷系四環(huán)三萜皂苷，總皂苷含量可達8%~12%，其中所含單體有人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh等9種，但以Rb1和Rg1為主。三七總皂苷（PNS）水解所得苷元為人參二醇和人參三醇，但因無(wú)齊墩果酸而與人參不同。此外還含有絞股藍苷Ⅶ、Ⅹ，人參炔三醇。黃酮苷中有三七黃酮A（槲皮素）、三七黃酮B。止血有效成分為三七氨酸。三七氨酸的旋光異構體也有止血活血性，但含量甚微。
4，三七的主要成分是什么
三七傷藥顆粒的主藥成分是田七，又名三七，有活血止血的功效。醫生開(kāi)的是口服藥，如果配合云南白藥氣霧劑噴傷處，內服外用雙管齊下，效果會(huì )更好。到目前為止，從三七中分離得到的化學(xué)成分主要有皂苷、黃酮、揮發(fā)油、氨基酸、多糖、淀粉、蛋白質(zhì)等以及部分無(wú)機化學(xué)成分如氮、磷、鉀等大量元素和鈷、鉬、銫等微量元素。三七化學(xué)成分
1.揮發(fā)性成分
2.皂甙成分
3.從三七中分離到止血活血成分
4.其它成分三七還含16種氨基酸。
化學(xué)成分：該品主要含皂苷、黃酮苷、氨基酸等。止血活性成分為三七氨酸。
三七藥理作用
三七具有散瘀止血，消腫定痛之功效。主治咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外傷出血，胸腹刺痛，跌仆腫痛?！侗静菥V目》云：“三七止血，散血，定痛?！薄队耖彼幗狻吩疲骸叭吆蜖I(yíng)止血，通脈行瘀，行瘀血而斂新血?！?
該品能夠縮短出血和凝血時(shí)間，具有抗血小板聚集及溶栓作用；能夠促進(jìn)多功能造血干細胞的增殖，具有造血作用；能夠降低血壓，減慢心率，對各種藥物誘發(fā)的心律失常均有保護作用；能夠降低心肌耗氧量和氧利用率，擴張腦血管，增強腦血管流量；能夠提高體液免疫功能，具有鎮痛、抗炎、抗衰老等作用；能夠明顯治療大鼠胃黏膜的萎縮性病變，并能逆轉腺上皮的不典型增生和腸上皮化生，具有預防腫瘤的作用。三七又名田七，為傘形目五加科植物。中藥材三七是以其根部作為藥用部分，具有散瘀止血，消腫定痛之功效。主治咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外傷出血，胸腹刺痛，跌仆腫痛。
5，三七成分和功用
三七不管是對止血化瘀和我們的心腦血管都有不錯的幫助。你好：1，硫磺皂可以消炎殺菌，不可以消毒。主要用于皮膚的消炎殺菌。2，可以祛痘。但要有耐心。3主要成分：脂肪酸鈉、硫磺、色素、香精、抗氧螯合劑、甘油等。4，副作用是 剛開(kāi)始用的時(shí)候，皮膚會(huì )因為被硫磺侵襲造成脫皮現象，用幾次之后會(huì )消失。
編輯：娓娓三七也就是通常人們所說(shuō)的田七，三七別名較多，有金不換、人參三七、南國神草等，為五加科植物三七的根，全株皆可入藥，以三七的主根藥用價(jià)值最高，莖葉藥用價(jià)值最次（市場(chǎng)上基本不流通，都是進(jìn)入藥廠(chǎng)，提取有效成分），三七的功效主要是針對血液方面的，具有止血化瘀、活血養血的雙向調節作用，有止血不留淤、活血不傷新血的特點(diǎn)。
三七的功效與作用1.對血液和造血系統的作用
三七具有良好的止血功效，能明顯縮短出血和凝血時(shí)間；能促進(jìn)各類(lèi)血細胞分裂生長(cháng)、增加數目，具有顯著(zhù)補血功效；具有活血化瘀、去瘀生新的明顯療效。
三七的功效與作用2.對心血管系統的作用
三七在明顯擴張血管、減低冠脈阻力、增加冠脈流量、加強和改善冠脈微循環(huán)、增加營(yíng)養性心肌血流量的同時(shí)，能降低動(dòng)脈壓，略減心率，使心臟工作量減低，從而明顯減少心肌的耗氧量，可治療心肌缺血、心絞痛及休克。
三七的功效與作用3.對神經(jīng)系統的作用
三七地上部份對中樞神經(jīng)有抑制作用，表現為鎮靜、安定與改善睡眠等功用；地下部分能興奮中樞神經(jīng)，提高腦力和體力，表現出抗疲勞性；其各個(gè)部分均有利于增強記憶能力，并有明顯鎮痛作用。
三七的功效與作用4.田七對免疫系統的功用
田七（三七）總皂苷可顯著(zhù)提高巨噬細胞的吞噬率和吞噬指數，提高外圍血中白細胞總數，減少白細胞的移動(dòng)指數，田七具有一定的免疫調節作用。
三七的功效與作用5.對物質(zhì)代謝的影響
6，三七粉含哪15種元素
三七塊根含總皂苷約12％，一般認為是三七的主要藥理活性成分?，F從三七各部位分離得到20種達瑪烷(Dammarane)型皂貳。根據皂貳酸液加熱水解后產(chǎn)生次皂貳元結構的不同，可分成人參皂貳(gln猶noside)Rg、Rb、Rc三種類(lèi)型。三七中Rg型皂貳包括人參皂貳R9l、 Rg2、 Re、 Rh， 三七皂貳 (notog5nsenoside)RhR。、R3、R6，次皂貳元均為人參三醇(panaxa顛01)；Rb型皂貳包括人參皂成肋?☆Rb2、Rbl、Rc、Rd、F1．二亡皂貳Fa、Fc、Fe、Rd，次皂貳元均為人參二醇(PanaxadioU；Ro型皂貳為齊敦果烷(0Ieanane)型衍生物，水解后可得到齊敦果酸(01eano比acZd)；但三七告部位均未分離出Ro型皂貳。
二七根中Rg型與肋型皂貳的比率為100：75。三七葉、三七花中以Rb型皂貳較多，Rg型皂貳含量極少。三七根中除含有皂貳外， 尚含有少量三七黃酮A(椒皮素)。含量更少的黃酮醇貳一三七黃酮B，其貳元亦為柵皮素。此外還含有少量揮發(fā)油，主要成分為卜欖香烯(A—elemene)、d一雪松烯(d—cedrene)、d一琺巴烯(d寸opaene)等8種倍半蔽烯成分。另外還含有生物堿、A一谷醇，胡蘿L賦，止血作用的氨基酸一卜草?；籐—a，A一二氨基丙酸(denejchlne)、蔗糖、多糖等。
L活中的無(wú)機元素，無(wú)論是常量元素還是微量元素都是對人體有重要的生理作用的物質(zhì)。隨著(zhù)分子生物學(xué)、臨床化學(xué)的發(fā)展，微量元素在人體內和各種生物體內的作用越來(lái)越受到醫藥界、生物化學(xué)界的重視，如鋅(zn)、錳(Mn)、銅(Cu)已被稱(chēng)作生命悠關(guān)的元素。有些元素是體內重要物質(zhì)的原料，如碘(I)是甲狀腺激素的原料；鉆(C。)是維生素B1：的原料；鐵(Fe)、鋅(Zn)、錳(Mn)、鋼(Mo)則是酶和其它活性蛋白質(zhì)的原料。這些微量元素是機體必需的營(yíng)養素。缺乏這些微量元素會(huì )引起特殊的元素缺乏癥。如果人體內缺乏Fe則會(huì )導致低色素貧血癥；如果缺乏CM會(huì )造成低色素小細胞貧血、脫發(fā)，骨筋生成障礙發(fā)生骨質(zhì)疏松；缺乏zn則產(chǎn)生生長(cháng)遲緩、食欲不振、宰九痙縮、皮膚變性；缺乏錳(Mn)兒童骨質(zhì)停止生長(cháng)，肌腿結締組織發(fā)育不全，成年人食欲不振，體重下降，發(fā)育不良，生殖功能低下，脂肪與蛋白質(zhì)代謝障礙，甚至出現精神癥狀；缺乏Mn還與動(dòng)脈硬化、心肌梗塞有密切關(guān)系，補充適量的Mn可以改善其病理過(guò)程。三七是補充和治療這種元素缺乏癥的重要藥物之一。
近年來(lái)，吉林農業(yè)大學(xué)特產(chǎn)系李向高等人，分別用活化分析法和原于吸收分光光度法，測定了三七中所含元素及其含量，證明三七含有15種微量元素。是一種人體需要的微量元素，你可以通過(guò)食物補充。
日常生活中含較多的食物有海味品、肉類(lèi)（特別是動(dòng)物的腎臟）以及大米、谷類(lèi)等。
7，三七粉的成分有哪些
三七粉的成分主要是植物三七的根莖部分，“三七粉”是植物三七（學(xué)名：Panax pseudo-ginseng）的根莖制品，是用三七主根打成的粉，是盤(pán)龍云海的主要成分。別名：田七粉，金不換。產(chǎn)自于云南文山州，故名文山三七又名文州三七，性溫，味甘微苦，入肝、胃、大腸經(jīng)。有稱(chēng)北人參，南三七。人參補氣第一，三七補血第一。1、三七總皂苷：皂苷是三七主要有效活性成分，也是目前研究較為系統的化學(xué)物質(zhì)。迄今為止,已從三七的不同部位分離得到54種單體皂苷成分,這些單體皂苷成分大多數為達瑪烷型的20(S)—原人參二醇型和20-(S)原人參三醇型。三七的地下部分既有20(S)—原人參二醇型皂苷，也含20(S)原人參三醇型皂苷。三七的地上部分以20(S)—原人參二醇型皂苷為主。
藥效：三七皂苷的主要功效是活血化淤、疏通經(jīng)脈，也正是皂苷所起的作用，還有輔助美白祛斑作用。
2、黃酮類(lèi)化合物：黃酮類(lèi)化合物是三七有效活性成分之一。目前從三七分離得到的有三七黃酮A和三七黃酮B2種。
藥效：降低血管的脆性，及改善血管的通透性、降低血脂、膽固醇和改善血液微循環(huán)，用于防治老年高血壓和腦溢血等心腦血管疾病。
3、三七素：1981年日本科學(xué)家從三七中發(fā)現了具有止血活性的成分，命名為三七素。它其實(shí)是一種特殊的氨基酸。，人參屬的幾種重要中藥均含有止血成分三七素，但以三七中含量最高（0.90%），人參次之(0.50%)，西洋參最低（0.31%）。
藥效：止血，三七的止血功效就是三七素起作用
4、糖類(lèi)成分：糖和它的衍生物在自然界中廣泛存在。三七中含有鼠李糖、木糖和葡萄糖，低聚糖和多糖。1985年，日本科學(xué)家水谷先生等首先從三七中得具有增強機體免疫功能效用的活性多糖（2A-1），1987年，還是日本科學(xué)家大谷等又從三七中分離到了一種多糖成分,命名為三七多糖A( Sanchinan)—A(SA)。
藥效：抗衰老，抗疲勞，增強免疫力
5、氨基酸成分：三七粉含有19種以上的氨基酸,有8種人體必需的氨基酸。
藥效：抗疲勞，增強免疫力
6、揮發(fā)油：我國科學(xué)家魯歧等從三七揮發(fā)油總油中分離鑒定出34種化合物,主要是酮烯烴環(huán)烷烴倍半萜類(lèi)脂肪酸酯苯取代物萘取代物。之后，帥緋等又從三七花中從分離鑒出了24種揮發(fā)油成分。
藥效：清除自由基，美容的作用，還有三七中的揮發(fā)油對大腦延髓有抑制作用，鎮靜安神，其中的β—欖香烯有抗癌作用。
7、其他有效成分三七除了以上介紹的化學(xué)成分外，還含有植物油脂、甾醇和炔、烯、烴類(lèi)化合物等化學(xué)物質(zhì)。
8、科學(xué)家從三七根、三七花、果實(shí)中均分得了β-谷甾醇，β-谷甾醇具有降血脂及抗皮膚潰瘍等作用。
9、楊平等（1993）從三七根的脂溶性部分分離到一個(gè)炔烯烴類(lèi)化合物，人參炔三醇（panaxytriol）。藥理研究表明，該化合物具有較強的防癌和抗癌作用。三七粉的成分和三七主根一樣，富含三七皂苷、三七多糖、三七素、黃酮有效成分，具有止血、活血化瘀、消腫定痛、滋補強壯、抗疲勞、耐缺氧、抗衰老、降血脂、降血糖、提高機體免疫功能等作用。1、擴張血管、降低血壓，改善微循環(huán)，增加血流量，預防和治療心腦組織缺血、缺氧癥
三七能擴張心、腦組織血管，在降低血壓的同時(shí)增加心臟冠狀動(dòng)脈和腦血管的 血流量，改善心、腦組織的血液微循環(huán)，明顯提高對心、腦組織細胞的供氧能力，有效預防和治療心、腦組織器官缺血、缺氧病癥。此外，三七還能降血脂、降膽固醇、抑制動(dòng)脈 硬化
2、促進(jìn)蛋白質(zhì)、核糖核酸（RNA）、脫氧核糖核酸（DNA）合成，強身健體
3、促進(jìn)血液細胞新陳代謝，平衡調節血液細胞
4、雙向調節中樞神經(jīng)，提高腦力，增強學(xué)習和記憶能力三七粉是用三七主根打成的粉。三七粉的成分和三七主根一樣，富含三七皂苷、三七多糖、三七素、黃酮有效成分，具有止血、活血化瘀、消腫定痛、滋補強壯、抗疲勞、耐缺氧、抗衰老、降血脂、降血糖、提高機體免疫功能等作用。
8，三七的成分是什么請問(wèn)做其主要有效成分最適合的的方法如果用
高效液相色譜儀操作步驟： 1)． 過(guò)濾流動(dòng)相，根據需要選擇不同的濾膜。 2)． 對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。 3)． 打開(kāi)hplc工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動(dòng)相管道，連接檢測系統。 4)． 進(jìn)入hplc控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。 5)． 有一段時(shí)間沒(méi)用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10 ml/min。 6)． 調節流量，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線(xiàn)，觀(guān)察基線(xiàn)的情況。 7)． 設計走樣方法。點(diǎn)擊file，選取select users and methods，可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法，點(diǎn)擊new method。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括：a.進(jìn)樣前的穩流，一般2-5分鐘；b.基線(xiàn)歸零；c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉換；d.走樣時(shí)間，隨不同的樣品而不同。 8)． 進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過(guò)濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記錄數據和做標記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線(xiàn)，洗掉剩余物。 9)． 關(guān)機時(shí)，先關(guān)計算機，再關(guān)液相色譜。 10)． 填寫(xiě)登記本，由負責人簽字。三七含量測定
取本品粉末（過(guò)三號篩）0.5克，精密稱(chēng)定，置索氏提取器中，加乙醚適量，加熱回流1小時(shí)，棄去乙醚液，藥渣揮去乙醚，置于索氏提取器中，加甲醇適量，加熱提取至甲醇無(wú)色，取甲醇提取液，揮干，殘渣加甲醇使溶解，定量轉移至20毫升量瓶中，加甲醇到刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rb1及人參皂苷Rg1對照品適量精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1毫升各含0.5毫克的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液2微升，對照品溶液2微升與4微升，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿—甲醇—水（13：7：2）10攝氏度以下放置12小時(shí)的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在110攝氏度加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)媚z布固定，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
本品含人參皂苷Rb1（C54H92023）和人參皂苷Rg1（C42H72O14）的總量不得小于3.8%。
三七 Radix Notoginseng
?。ㄓⅲ㏒anchi
別名 人參三七、田七、盤(pán)龍七、金不換。
來(lái)源 為五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen的根。
植物形態(tài) 多年生草本，高達60cm。根莖短，莖直立，光滑無(wú)毛。掌狀復葉，具長(cháng)柄，3～4片輪生于莖頂；小葉3～7，橢圓形或長(cháng)圓狀倒卵形，邊緣有細鋸齒。傘形花序頂生，花序梗從莖頂中央抽出，長(cháng)20～30cm?；ㄐ?，黃綠色；花萼5裂；花瓣、雄蕊皆為5。核果漿果狀，近腎形，熟時(shí)紅色。種子1～3，扁球形?；ㄆ?～8月，果期8～10月。
生于山坡叢林下?，F多栽培于海拔800～1000m的山腳斜坡或土丘緩坡上。主產(chǎn)云南、廣西、四川。
采制 種后第3年冬季及夏末初秋采挖。去須根，曝曬至半干，用于搓揉，再曝曬，重復數次，置麻袋中加蠟打光。
性狀 根圓錐形、紡錘形或不規則塊狀，長(cháng)1．5～5cm，直徑1．2～2cm。表面灰黃色或棕黑色，具蠟樣光澤，有不規則細紋及少數橫長(cháng)皮孔；上部有數瘤狀隆起的支根斷痕，頂端殘留根莖基。質(zhì)堅實(shí)，擊碎后皮部與木部常分離；橫切面灰白色或黃棕色，皮部有棕色小點(diǎn)（樹(shù)脂道），味苦、微甜。
化學(xué)成分 含皂甙，主要為人參皂甙Rb1、Rg1 、Rg2和少量人參皂甙Ra、Rb2、Rb和Re。此外，尚含黃酮甙、淀粉、蛋白質(zhì)、油脂等。
性味 性溫，味甘、微苦。
功能主治 散瘀止血，消腫定痛。用于各種內、外出血，胸腹刺痛，跌撲腫痛。
三七種植過(guò)程和種植要求
三七是一種十分嬌嫩的植物，需要在人工搭建的蔭棚下生長(cháng)，對光的需求僅為自然光強的10～20%，對水分的要求也很苛刻，不能過(guò)多，也不能過(guò)少。因此，在長(cháng)達3年的生長(cháng)過(guò)程中，更需要人們的精心管理和細心呵護。稍不留神就會(huì )全軍覆沒(méi)，顆粒無(wú)收。為此，文山州專(zhuān)門(mén)成立了文山州三七研究所來(lái)對其進(jìn)行專(zhuān)門(mén)的研究，了解它們的脾氣，研究保護它們順利成長(cháng)的方法。在三七栽培過(guò)程中，人們需要經(jīng)過(guò)選地、整地、播種、定植、施肥、防治各種病蟲(chóng)害等一系列的管理，才能獲得豐收的喜悅。三七種植過(guò)的土地要經(jīng)過(guò)10年以上的輪作才能再進(jìn)行種植。 [采收]經(jīng)過(guò)3年漫長(cháng)的時(shí)間，三七終于可以收獲了。三七最佳的收獲時(shí)間每年的9～11月，也就是中秋節前后。這段時(shí)間采收的三七產(chǎn)量高，質(zhì)量好。根據文山州三七研究所專(zhuān)家們的研究結果，9～11月三七中的總皂苷、三七素、黃酮和多糖等活性成分均上一年中含量最高的。 三七采收后必須立刻進(jìn)行初加工。加工方法是在潔凈的地方，摘除地上莖，洗凈泥土，剪去根莖、支根和須根。然后進(jìn)行晾曬或50～55℃衡溫烘烤，然后進(jìn)行手工揉搓，修剪、分級、檢測、包裝。
9，三七中含哪些氨基酸成分
一般來(lái)說(shuō)人體必須的17種氨基酸，也較為重視
氨基酸的定性測定
一、氨基酸的一般顯色反應
本節介紹三種顯色反應：茚三酮法、吲哚醌法和鄰苯二甲醛法。前二種是經(jīng)典的常用顯
色法，后一種是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的熒光顯色法，具有靈敏度高的特點(diǎn)。
1. 茚三酮法
顯色方法有下列數種：
①常用法：將點(diǎn)有樣品的層析或電泳完畢的濾紙充分除盡溶劑，用 5g/l 茚三酮無(wú)水丙
酮溶液噴霧，充分吹干，置65℃烘箱中約30min（溫度不宜過(guò)高，避免空氣中氨，以免背
景泛紅色），氨基酸斑點(diǎn)呈紫紅色。
為了使各種氨基酸呈現不同顏色，可用下列方法：
②用 0.4g 茚三酮，10g 酚和90g 正丁醇的混合液顯色。
③用 1g/l 茚三酮無(wú)水丙酮溶液顯色完畢后，再用鹽酸蒸汽熏1min。
④用 1g 茚三酮，600ml 無(wú)水乙醇，200ml 冰醋酸及80ml2,4,6-三甲基吡啶混合液80
℃染色5～10min。
為了使顯色穩定，可用下列方法：
⑤配制含醋酸鎘 2g 加蒸餾水200ml 及冰醋酸40ml 的貯存液。將上述貯存液加200ml
丙酮及2g 茚三酮，即為顯色液。點(diǎn)有樣品的濾紙上浸有此顯色液后，放置于盛有一小杯濃
硫酸的密閉玻璃容器中，25℃，18h，或較高溫度下適當縮短時(shí)間。背景色淺，氨基酸斑點(diǎn)
也比較穩定。
⑥用含 2g/lcocl2(或cuso4)的4g/l 茚三酮異丙酮溶液顯色時(shí)，氨基酸斑點(diǎn)呈紅色，也
可在茚三酮顯色后噴以含鈷、鎘或銅等無(wú)機離子的異丙醇溶液，斑點(diǎn)自藍紫色變成紅色。
2．吲哚醌法
（1）原理
各種氨基酸與吲哚醌試劑能顯示不同顏色，因此可借此辯認氨基酸。氨對吲哚醌顯色沒(méi)
有妨礙，但其靈敏度較茚三酮法稍差，顯色不穩定，顏色只有在絕對干燥的環(huán)境中才能保存。
（2）試劑
①顯色劑：1g 吲哚醌溶于100ml 乙醇及10ml 冰醋酸中（若冰醋酸用量減少則靈敏度
稍差）。
②底色褪色劑：在 100ml 200g/l 碳酸鈉溶液中加入60g 硅酸鈉（na2sio3?9h2o）在水
?。?0～70℃）中加熱攪拌直至完全溶解，待溶液比較清澈為止。在溶解過(guò)程中，有時(shí)硅酸
鈉會(huì )結成凝膠，此時(shí)只需繼續攪拌即可溶解。配制時(shí)若硅酸鈉用量多則褪色較快，但背景容
易變黃，硅酸鈉用得少（40g），雖裉色較慢，但背景較為潔白。
顯色步驟
層析或電泳后濾紙烘干后，仔細噴上或涂上顯色劑，用電吹風(fēng)迅速吹干，待醋酸氣味不
太刺鼻時(shí)移置100℃烘箱烘5～15min，直至顯色為止（溫度不要太高，以免引起減色）注
意觀(guān)察所顯出的顏色，然后均勻地涂上底色褪色劑，紙的背景即由黃色變?yōu)榻{紅而后逐漸變
淺，待黃色背景幾乎褪盡時(shí)，迅速用電吹風(fēng)吹干，并隨時(shí)觀(guān)察顏色的變化。例如蘇氨酸在褪
色前為淺紅帶褐色，褪色后則呈橙黃色或黃色：脯氨酸在褪色前為藍色，吹干時(shí)很快褪成無(wú)
色。室溫較低時(shí)，底色褪色很慢，此時(shí)可將褪色劑加溫到30～40℃。溫度過(guò)高也不宜，因
氨基酸斑點(diǎn)的褪色速度也同時(shí)加快，應該避免。
其他顯色步驟：顯色劑為 1g 吲哚醌，1.3g 醋酸鋅溶解于70～80ml 熱異丙醇中，冷卻
后加1ml 吡啶?；蛘?g 吲哚醌，1.5g 醋酸鋅溶解于95ml 熱異丙醇中，加3ml 水，冷卻
后加1ml 冰醋酸。點(diǎn)有樣品的濾紙仔細噴以顯色劑后，80～85℃放置10min，背景可用水
迅速浸洗去而不使氨基酸斑點(diǎn)退去
由于吲哚醌試劑配制方法不同，對同一種氨基酸所顯顏色往往也有差異。
3．鄰苯二甲醛法
鄰苯二甲醛法是目前紙上層析、硅膠薄層層析熒光顯色氨基酸最靈敏的方法之一，也可
用于氨基酸溶液定量，并推廣應用于乙內酰苯硫脲氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)的檢出和定量。根
據文獻報道，氨基酸紙上層析靈敏度達0.5μmol，在硅膠薄層層析上為0.05～0.2μmol。
這里介紹在紙上層析顯現氨基酸方法。（熒光胺是另一種常用的熒光試劑，由于熒光胺來(lái)源
比較困難，這里未作介紹）
（1）原理
鄰苯二甲醛在 2-巰基乙醇存在下，在堿性溶液中與氨基酸作用產(chǎn)生熒光化合物，最適
的激發(fā)光和發(fā)射光波長(cháng)分別為340nm 和455nm。
各種氨基酸顯現的熒光強度不同，其相對熒光強度由大到小大致順序如下：天門(mén)冬氨酸，
異亮氨酸，甲硫氨酸，精氨酸，組氨酸，亮氨酸，絲氨酸，纈氨酸，谷氨酸，蘇氨酸，甘氨
酸，色氨酸，丙氨酸，苯丙氨酸，賴(lài)氨酸，酪氨酸，nh3，脯氨酸和半胱氨酸。
（2）試劑
鄰苯二甲醛顯色液：取0.1g 鄰苯二甲醛，0.1mg 巰基乙醇，1ml 三乙胺，加丙酮+石油
醚（60℃～90℃）（1+1）的混合溶劑至100ml。放置0.5h 后使用。
顯色步驟
將含有氨基酸樣品的濾紙浸入鄰苯二甲醛顯色液中 1min，冷風(fēng)吹干，在溫度18℃以下，
濕度50%～90%之間顯色0.5h，于紫外燈下觀(guān)察熒光點(diǎn)。
說(shuō)明
在濾紙上顯現氨基酸時(shí)，鄰苯二甲醛濃度以 0.1%為宜。顯色時(shí)必須有一定的濕度，以
便氨基酸溶解，提高分子碰撞機率，并使極性基團解離，促進(jìn)反應趨于完全。濕度太低，顯
不出熒光。溫度對顯現的熒光延時(shí)有顯著(zhù)影響，溫度高熒光延時(shí)短，溫度低熒光延時(shí)長(cháng)。
二、個(gè)別氨基酸的顯色反應
利用個(gè)別氨基酸與某些試劑具有特殊的顯色反應定性氨基酸?？蓱糜诩垖游龊图堧?
泳顯色，也可單獨應用。方法很多，僅將常用的方法介紹如下：
1．精氨酸的顯色——坂口（sakaguchi）反應
(1)第一種方法
試劑：①5g 尿素溶解于100ml0.1g/lα-萘酚乙醇中。使用前，每100ml 加約5g koh。
②0.7ml 溴水溶解于100ml 5%naoh 中。
顯色步驟：在點(diǎn)有樣品的濾紙上噴試劑①后，在空氣中吹幾分種，再?lài)娫噭?。精?
酸或含精氨酸的多肽顯紅色。此試劑對含精氨酸的蛋白質(zhì)也適用。
(2)第二種方法：
試劑：①1g/l 8-羥基喹啉的丙酮溶液。②0.02ml 溴水溶解于100ml 0.5mol/lnaoh 溶
液中。
顯色步驟：將點(diǎn)有樣品的濾紙烘干后，噴上試劑①，吹干后，再?lài)娫噭?。精氨酸?
其他胍類(lèi)物質(zhì)顯桔紅色。
2．胱氨酸和半胱氨酸的顯色
試劑：①1.5g 亞硝基鐵氰化鈉（na2fe(cn)5no2?5h2o）溶于5ml 2mol/l h2so 4 溶液
中，加95ml 甲醇。此時(shí)會(huì )有沉淀產(chǎn)生，可保存一個(gè)月以上。使用時(shí)在每100ml 上述溶液
中加10ml 28%氨水，過(guò)濾除去沉淀，清液僅能保持一天左右。②2g 氰化鈉溶于5ml 水中，
然后加95ml 甲醇。此時(shí)有沉淀產(chǎn)生，使用時(shí)只需搖勻即可。
顯色步驟：半胱氨酸的顯色：在濾紙上噴以試劑①的清液，5min 后半胱氨酸顯紅色。
胱氨酸的顯色：先將濾紙浸入試劑②，迅速取出，稍等片刻再?lài)娫噭┘椎那逡海?min 后胱
氨酸顯紅色。也可以把試劑②配制的濃度增加一倍，在顯色前混和，再?lài)姷綖V紙上。
3．甘氨酸的顯色
試劑；0.1g 鄰苯二甲醛溶于100ml 77%乙醇中。
顯色步驟：點(diǎn)有樣品的濾紙噴上試劑，甘氨酸顯墨綠色，在汞燈（365nm）下顯巧克力
棕色。吲哚醌顯色后，再用此試劑仍有效。以甘氨酸為n 端的小肽也能顯色，但其n 端被
保護后，以及其他氨基酸均不顯色。
4．脯氨酸的顯色
試劑：1g 吲哚醌和1.5g 醋酸鋅，1ml 醋酸，5ml 蒸餾水混和，再加入95ml 異丙醇。
新鮮配制。
顯色步驟：層析濾紙除盡溶劑，噴上以上試劑，80℃～85℃烘箱內放置30min，脯氨酸
顯藍色，再以30℃溫水漂洗除去多余的試劑后，背景為白色或淺黃色。
也可剪下脯氨酸斑點(diǎn)，在試管中加入5ml 水飽和酚，在黑暗中洗脫15min，間歇振搖，
于610nm 測定其吸光度。從已知標準曲線(xiàn)即可求得樣品內脯氨酸含量，測定范圍5～20μg。
5．絲氨酸和羥賴(lài)氨酸的顯色
試劑：①0.035mol/l 過(guò)碘酸鈉（748mgnaio4 溶于數毫升甲醇中，加2 滴6mol/l 鹽酸，
再用甲醇稀釋至100ml）。②15g 醋酸銨加0.3ml 冰醋酸，加1ml 乙酰丙酮，用甲醇稀釋到
100ml。
顯色步驟：點(diǎn)有樣品的濾紙吹干，先噴試劑①，近干后再?lài)娫噭?，室溫放?2h，紫
外燈下照射0.5h，絲氨酸和羥賴(lài)氨酸呈黃色斑點(diǎn)，在紫外線(xiàn)下都有熒光。
6．羥脯氨酸的顯色
試劑：①1g 吲哚醌溶于100ml 乙醇及10ml 冰醋酸。②1g 對二甲胺苯甲醛溶于100ml
的丙酮濃鹽酸（9＋1）混合液中。（此試劑不穩定，隔數日后溶液顏色增深發(fā)黑，靈敏度降
低，故用時(shí)新鮮少量配制。
顯色步驟：將待鑒定的溶液點(diǎn)于小方塊紙上，干后先點(diǎn)上試劑①，熱風(fēng)吹干。這時(shí)純
羥脯氨酸呈墨綠色，純脯氨酸呈深藍色（極靈敏），對其他氨基酸呈程度不同的紫紅色（不
太靈敏）；然后再點(diǎn)上試劑②吹干，如溶液中含有羥脯氨酸即轉變?yōu)槊倒寮t色，而其他氨基
酸與吲哚醌所生成的顏色則褪去。
7．色氨酸的顯色
(1)第一種方法
試劑：1g 對二甲氨基苯甲醛加90ml 丙酮，10ml 濃鹽酸。新鮮配制。
顯色步驟：點(diǎn)有樣品的濾紙干燥后，噴上以上試劑，在室溫下放置幾分鐘后，色氨酸
顯藍色或紫紅色。茚三酮顯色后，仍可使用本法。
(2)第二種方法：
試劑：10ml 35%甲醛加10ml25%鹽酸，20ml 無(wú)水乙醇。
顯色步驟：點(diǎn)有樣品的濾紙噴上以上試劑后，100℃烘5min，色氨酸在長(cháng)波長(cháng)紫外光下
呈現熒光（黃-橙-帶綠色）。
8．酪氨酸的顯色
試劑：①0.1%α-亞硝基β-萘酚的95%乙醇溶液。②10%硝酸水溶液。
顯色步驟：點(diǎn)有樣品的濾紙噴上試劑①后，吹干，再?lài)娫噭?，然后?00℃烘3min，
酪氨酸或含酪氨酸的多肽在淺灰綠色的背景上顯紅色，0.5h 后轉變?yōu)榻奂t色，其后漸退去。
靈敏度1～2μg 酪氨酸。茚三酮顯色后，再用此試劑處理，仍能顯色，茚三酮所顯出的紫紅
色斑點(diǎn)變成紅色。
9．酪氨酸和組氨酸的顯色——pauly 反應
試劑：①4.5g 對氨基苯磺酸與45ml 12mol/l 鹽酸共熱溶解，以蒸餾水稀釋至500ml。
用時(shí)取出30ml，在0℃與等體積的5%亞硝酸鈉水溶液相混合。（室溫放置太長(cháng)會(huì )失效）
②10%碳酸鈉水溶液。
顯色步驟：點(diǎn)有樣品的濾紙上噴試劑①，片刻后再?lài)娫噭?。組氨酸及含組氨酸的多
肽顯桔紅色；酪氨酸及含酪氨酸的多肽顯淺紅色。
第六節 氨基酸定量測定
一、氨基酸的一般定量測定
（一）甲醛滴定法
1．原理
氨基酸具有酸性的-cooh 基和堿性的-nh2 基。它們相互作用而使氨基酸成為中性的內
鹽。當加入甲醛溶液時(shí)，-nh2 基與甲醛結合，從而使其堿性消失。這樣就可以用標準強堿
溶液來(lái)滴定-cooh 基，并用間接的方法測定氨基酸總量。反應式（有三種不同的推論）如
下：
2．方法特點(diǎn)及應用
此法簡(jiǎn)單易行、快速方便，與亞硝酸氮氣容量法分析結果相近。在發(fā)酵工業(yè)中常用此
法測定發(fā)酵液中氨基氮含量的變化，來(lái)了解可被微生物利用的氮源的量及利用情況，并以此
作為控制發(fā)酵生產(chǎn)的指標之一。脯氨酸與甲醛作用時(shí)產(chǎn)生不穩定的化合物，使結果偏低；酪
氨酸含有酚羧基，滴定時(shí)也會(huì )消耗一些堿而致使結果偏高；溶液中若有銨存在也可與甲醛反
應，往往使結果偏高。
3．操作方法
吸取含氨基酸約 20mg 的樣品溶液于100ml 容量瓶中，加水至標線(xiàn)，混勻后吸取20.0ml
置于200ml 燒杯中，加水60ml，開(kāi)動(dòng)磁力攪拌器，用0.05mol/l 氫氧化鈉標準溶液滴定至
酸度計指示ph8.2，記錄消耗氫氧化鈉標準溶液ml 數，供計算總酸含量。
加入10.0ml 甲醛溶液，混勻。再用上述氫氧化鈉標準溶液繼續滴定至ph9.2，記錄消
耗氫氧化鈉標準溶液毫升數。
同時(shí)取 80ml 蒸餾水置于另一200ml 潔凈燒瓶中，先用氫氧化鈉標準溶液調至ph8．2，
（此時(shí)不計堿消耗量），再加入10.0ml 中性甲醛溶液，用0.05mol/l 氫氧化鈉標準溶液滴定
至ph9.2，作為試劑空白試驗。
4．結果計算
氨基酸態(tài)氮質(zhì)量分數（%）=
式中：v1——樣品稀釋液在加入甲醛后滴定至終點(diǎn)（ph9.2）所消耗氫氧化鈉標準溶液
的體積，ml；
v2——空白試驗加入甲醛后滴定至終點(diǎn)所消耗的氫氧化鈉標準溶液的體積，ml；
c——氫氧化鈉標準溶液的濃度，mol/l；
m——測定用樣品溶液相當于樣品的質(zhì)量，g；
0.014——氮的毫摩爾質(zhì)量，g/mmol。
5．說(shuō)明
①本法準確快速，可用于各類(lèi)樣品游離氨基酸含量測定。②渾濁和色深樣液可不經(jīng)處
理而直接測定。
(二)茚三酮比色法
1．原理
氨基酸在堿性溶液中能與茚三酮作用，生成藍紫色化合物（除脯氨酸外均有此反應），
可用吸光光度法測定。
該藍紫色化合物的顏色深淺與氨基酸含量成正比，其最大吸收波長(cháng)為 570nm，故據此
可以測定樣品中氨基酸含量。
2．操作方法
(1)標準曲線(xiàn)繪制
準確吸取 200μg /ml 的氨基酸標準溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml（相當于
0、100、200、300、400、500、600μg 氨基酸），分別置于25ml 容量瓶或比色管中，各加
水補充至容積為4.0ml，然后加入茚三酮溶液（20g/l）和磷酸鹽緩沖溶液（ph 為8.04）各
1ml，混合均勻，于水浴上加熱15min，取出迅速冷至室溫，加水至標線(xiàn)，搖勻。靜置15min
后，在570nm 波長(cháng)下，以試劑空白為參比液測定其余各溶液的吸光度a。以氨基酸的微克
數為橫坐標，吸光度a 為縱坐標，繪制標準曲線(xiàn)。
(2)樣品測定
吸取澄清的樣品溶液 1～4ml，按標準曲線(xiàn)制作步驟，在相同條件下測定吸光度a 值，
用測得的a 值在標準曲線(xiàn)上可查得對應的氨基酸微克數。
3．結果計算
氨基酸含量（mg/100g）=
式中：c——從標準曲線(xiàn)上查得的氨基酸的質(zhì)量數，μg；
m——測定的樣品溶液相當于樣品的質(zhì)量，g。
4．說(shuō)明及注意事項
①通常采用的樣品處理方法為：準確稱(chēng)取粉碎樣品 5～10g 或吸取樣液樣品5～10ml，
置于燒杯中，加入50ml 蒸餾水和5g 左右活性炭，加熱煮沸，過(guò)濾，用30～40ml 熱水洗
滌活性炭，收集濾液于100ml 容量瓶中，加水至標線(xiàn)，搖勻備測。
②茚三酮受陽(yáng)光、空氣、溫度、濕度等影響而被氧化呈淡紅色或深紅色，使用前須進(jìn)行
純化，具體操作可參閱黃偉坤等編著(zhù)《食品檢驗與分析》。
(三)非水溶液滴定法
1．原理
氨基酸的非水溶液滴定法是氨基酸在冰醋酸中用高氯酸的標準溶液滴定其含量。根據酸
堿的質(zhì)子學(xué)說(shuō)：一切能給出質(zhì)子的物質(zhì)為酸，能接受質(zhì)子的物質(zhì)為堿；弱堿在酸性溶劑中堿
性顯得更強，而弱酸在堿性溶劑中酸性顯得更強，因此本來(lái)在水溶液中不能滴定的弱堿或弱
酸，如果選擇適當的溶劑使其強度增加，則可以順利地滴定。氨基酸有氨基和羧基，在水中
呈現中性，而在冰醋酸中就能接受質(zhì)子顯示出堿性，因此可以用高氯酸等強酸進(jìn)行滴定。
本法適合于氨基酸成品的含量測定。允許測定的范圍是幾十毫克的氨基酸
2．測定
(1)直接法（適用于能溶解于冰醋酸的氨基酸）：精確稱(chēng)取氨基酸樣品50mg 左右，溶解
于20ml 冰醋酸中，加2 滴甲基紫指示劑，用0.100mol/l 高氯酸標準液滴定（用10ml 體積
的微量滴定管），終點(diǎn)為紫色剛消失，呈現藍色?？瞻坠転椴缓被岬谋姿嵋?，滴定至
同樣終點(diǎn)顏色。
(2)回滴法（適用于不易溶解于冰醋酸而能溶解于高氯酸的氨基酸）：精確稱(chēng)取氨基酸樣
品30～40mg 左右，溶解于5ml0.1mol/l 高氯酸標準溶液中，加2 滴甲基紫指示劑，剩余的
酸以醋酸鈉溶液滴定，顏色變化由黃，經(jīng)過(guò)綠、藍至初次出現不褪的紫色為終點(diǎn)。
3．說(shuō)明
(1)能溶解于冰醋酸的氨基酸，可以用直接法測定的有：丙氨酸、精氨酸、甘氨酸、組
氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、纈氨酸、異亮氨酸和蘇氨酸。不易溶解于冰
醋酸，但能溶解于高氯酸可以回滴法測定的有：賴(lài)氨酸、絲氨酸、胱氨酸和半胱氨酸。
(2)谷氨酸和天冬氨酸在高氯酸溶液中也不能溶解，可以將樣品溶解于2ml 甲酸中，再
加20ml 冰醋酸，直接用標準的高氯酸溶液滴定。
(四)鄰苯二甲醛法(opt 法)
1．原理
鄰苯二甲醛在 2-巰基乙醇存在下，于堿性溶液中與氨基酸作用產(chǎn)生熒光化合物，最適
的激發(fā)光和發(fā)射光波長(cháng)分別為340 和455nm?？赡墚a(chǎn)物為：
各種氨基酸顯現的熒光強度不同，其相對熒光強度由大到小大致順序如下：天門(mén)冬氨酸，
異亮氨酸，甲硫氨酸，精氨酸，組氨酸，亮氨酸，絲氨酸，纈氨酸，谷氨酸，蘇氨酸，甘氨
酸，色氨酸，丙氨酸，苯丙氨酸，賴(lài)氨酸，酪氨酸，nh3，脯氨酸，和半胱氨酸。
本法可用于測定游離氨基酸的含量。靈敏度較茚三酮法約高 100 倍以上，可測到0.1～
1×10－4mol 氨基酸。如用于血清中α-氨基氮的測定，每次血清用量只需5～10μl。與另一
種熒光試劑（螢光胺）一樣，空白無(wú)熒光，只有與氨基酸結合才產(chǎn)生熒光。缺點(diǎn)是與脯氨酸
不產(chǎn)生熒光，鄰苯二甲醛與半胱氨酸熒光值太低。熒光胺已有用于氨基酸自動(dòng)分析定量分析，
但由于試劑昂貴及個(gè)別氨基酸反應不滿(mǎn)意，目前還未普遍應用。
(五)三硝基苯磺酸法
三硝基苯磺酸（tnbs）是定量測定氨基酸的重要試劑之一。tnbs 在偏堿性的條件下
與氨基酸反應，先形成中間絡(luò )合物，如下式所示：
中間絡(luò )合物在光譜上有二個(gè)吸收值相近的高峰，分別位于355nm 和420nm 附近。然
而溶液一旦酸化，中間絡(luò )合物轉化成三硝基苯-氨基酸（tnp-氨基酸），420nm 處的吸收值
顯著(zhù)下降，而350nm 附近的吸收峰則移至340nm 處。
利用 tnbs 與氨基酸反應的這一特性，可在420nm 處（偏堿性溶液中）或在340nm
（偏酸性溶液中）對氨基酸進(jìn)行定量測定。下表列出各種氨基酸與tnbs 反應后在不同條
件下測定的吸光度。在340nm 處，各氨基酸的吸收度大致相近，而在420nm 處的吸光度
因氨基酸種類(lèi)而異；在加入適量so3
2－時(shí)，吸收值升高。
本法允許的測定范圍是 0.05～0.4μmol 氨基酸。
表 10-3 各種氨基酸與tnbs 反應后在不同條件下測定的吸光度
氨基酸種類(lèi) 堿性溶液① 酸性溶液加 so3
①取不同含量氨基酸液1ml，加4%nahco3 1ml，0.1%tnbs 1ml，于40℃反應2h，用水補充至4ml，
在420nm 處測定。制作氨基酸濃度—吸光度坐標圖，從曲線(xiàn)中求得各氨基酸于1μmol 時(shí)的吸光度。
②條件同上，但在與tnbs 反應時(shí)加0.01mol/l na2so3 1ml，最后總體積也是4ml，同樣在420nm 處
測定。
③條件同①，但與 tnbs 反應后加1mol/l hcl 1ml 酸化，在340nm 處測定。
(六)乙酰丙酮和甲醛熒光法
1．原理
氨基酸與乙酰丙酮和甲醛反應，生成 n-取代基2,6-二甲基-3,5-二乙?；?,4-二氫吡啶，
產(chǎn)生黃-綠色熒光，可用熒光分析法檢測。主要反應如下：
乙酰丙酮 甲醛 氨基酸 熒光物質(zhì)
2．試劑
混合試劑：取1mol/l 乙酸鈉溶液10ml，加入乙酰丙酮溶液0.4ml 和30%甲醛溶液1ml，
用水稀釋至30ml。
3．測定
取氨基酸液 1ml，加入混合試劑1ml，用棉花塞滿(mǎn)試管口，避光于100℃下加熱10min，
冷卻，加水2ml，然后測定熒光值。
表 10-4 各種氨基酸的發(fā)射波長(cháng)和檢測范圍
化合物（激發(fā)波長(cháng)405nm） 發(fā)射波長(cháng)（nm） 檢測范圍（mg/l）
甘氨酸 485 2～10
苯丙氨酸 490 8～40
絲氨酸 485 5～25
半胱氨酸（鹽酸鹽） 500 20～100
谷氨酸 485 20～100
與標準相比較求出樣品中的氨基酸含量。
二、個(gè)別氨基酸的定量測定
（一）賴(lài)氨酸的測定
1．原理
用銅離子阻礙游離氨基酸的α-氨基,使賴(lài)氨酸的ε-氨基可以自由地與1-氟-2,4 二硝基
苯(fdnb)反應,生成ε-dnp-賴(lài)氨酸。經(jīng)酸化和用二乙基醚提取,在波長(cháng)390nm 處有吸收峰,
從而求出樣品中游離賴(lài)氨酸的含量.
2．試劑
(1)氯化銅液：稱(chēng)28.0g 無(wú)水氯化銅，用水稀釋至1000ml。
(2)磷酸三鈉溶液：稱(chēng)68.5g 無(wú)水磷酸鈉,用水稀釋至1000ml。
(3)硼酸鹽緩沖液（ph9.1～9.2）：稱(chēng)54.64g 帶有10 結晶水的四硼酸鈉，用水稀釋至
1000ml 。
(4)磷酸銅懸浮液：攪拌情況下，把氯化銅液200ml，緩慢倒入400 ml 的磷酸三鈉溶液
中，把懸浮液以2000r/min 速度離心5min ，用硼酸鹽緩沖液再懸浮沉淀物，洗滌離心3 次，
把最后的沉淀物懸浮在硼酸鹽緩沖液中，并用緩沖液稀釋至1l。
(5)1-氟-2，4 二硝基苯(fdnb)溶液：吸取fdnb10ml 用甲醇稀釋至100ml。
(6)賴(lài)氨酸-hcl 標準溶液：稱(chēng)取一定量賴(lài)氨酸-hcl，用水配成200mg/l 的工作標準液。
(7)100g/l 丙氨酸溶液。
3．測定
(1)稱(chēng)取通過(guò)40 目篩的均勻試樣1.00g，置于100ml 燒瓶中。另吸取賴(lài)氨酸-hcl 標準工
作液5ml（相當1mg 賴(lài)氨酸-hcl），連同試劑空白同時(shí)進(jìn)行試驗。
(2)向各燒瓶中加入25ml 磷酸銅懸浮液，然后再加10%丙氨酸1.0ml,振搖15min。吸
取10%fdnb 溶液0.5ml.置于各處理燒瓶中,將燒瓶置沸水中加熱15min。
(3)取出燒瓶,立即加入1mol/lhcl 溶液25ml,并不斷搖動(dòng)使之酸化和分散均勻。
(4)燒瓶中的溶液冷卻至室溫,用水稀釋至100ml.取約40ml 懸浮液進(jìn)行離心。
(5)用25ml 二乙基醚提取上清液3 次，除去醚。并將溶液收集于有刻度試管中,于65℃
水浴中加熱15min，以除去殘留的醚。并記錄溶液的毫升數。
(6)吸取上述各處理液10ml，分別與95%乙醇溶液10ml 混合，用濾紙過(guò)濾。
(7)用試劑空白液凋零，測定樣液a390nm，與賴(lài)氨酸-hcl 標準液對照，求出樣品中賴(lài)氨
酸-hcl 的含量。
本法在 0～40mg/l 賴(lài)氨酸溶液范圍內呈良好線(xiàn)性關(guān)系。
4．說(shuō)明
(1)添加一定量的中性氨基酸如丙氨酸，增加總氨基酸的濃度，有助于賴(lài)氨酸-hcl 濃度
具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。
(2)用醚提取酸性溶液，可將所有中性或酸性的dnp-氨基酸衍生物除去，并把fdwb
的產(chǎn)物破壞，否則這些產(chǎn)物在390nm 處存在干擾。
（二）色氨酸的測定
1.原理
樣品中的蛋白質(zhì)經(jīng)堿水解后，游離的色氨酸與甲醛和含鐵離子的三氯乙酸溶液作用，生
成哈爾滿(mǎn)化合物（norharman），具有特征熒光值，可以進(jìn)行定量測定。
2．試劑
(1)0.3mmol/l 三氯化鐵-三氯乙酸溶液：稱(chēng)取三氯化鐵(fecl3?6h2o)41mg，加入10%三
氯乙酸溶液溶解并定溶至500ml。
(2)2%甲醛：量取甲醛溶液(36%～38%)5.5ml，加水至100ml。
(3)色氨酸標準溶液：稱(chēng)取10mg 色氨酸，用0.1mol/lnaoh 溶液溶解并定容至100ml,
置棕色瓶中備用,使用時(shí)用水稀釋成1mg/l 的標準溶液.
3．測定
稱(chēng)取樣品粉末 100～200mg 于離心管中，加入4ml 乙醚,搖勻后過(guò)夜，以3000r/min 速
度離心。將乙醚提取液移入試管內,并用乙醚洗滌殘渣3 次，收集乙醚液于試管中，于40℃
水浴除去醚。殘留物中加入6.25mol/l n aoh 4ml，火焰封口，于110℃水解16～24h。水
解液用4mol/l hcl 溶液調節至ph6～8 后,用水定容至50ml,過(guò)濾備用。
吸取濾液 0.2ml，加入2%甲醛0.2ml 和0.3mmol/l 三氯化鐵-三氯乙酸混合液2ml，
搖勻后于100℃水浴中加熱1h，取出，冷卻后用水定容至10ml。在激發(fā)波長(cháng)為365nm，發(fā)
射波長(cháng)449nm 條件下，測定樣品的熒光強度，與色氨酸標樣作對照，求出樣品中色氨酸含
量。
本法在 0～10mg/l 色氨酸溶液范圍內呈良好線(xiàn)性關(guān)系。1988年，魯岐等學(xué)者對三七中的氨基酸進(jìn)行了分析測試，共測得16種氨基酸，其中7種為人體必必需氨基酸，總氨基酸的平均含量為7.73%。
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